Revision 1

#9776Store at -20C

1 Kit

(3 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Phospho-Myosin Light Chain 2 (Ser19) Antibody 3671 20 µl 18 kDa Rabbit 
Phospho-Myosin Light Chain 2 (Thr18/Ser19) Antibody 3674 20 µl 18 kDa Rabbit 
Myosin Light Chain 2 (D18E2) Rabbit mAb 8505 20 µl 18 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Myosin Light Chain 2 Antibody Sampler Kit provides an economical means to detect total, phosphorylated, and dual-phosphorylated myosin light chain 2. The kit contains enough primary and secondary antibody to perform two western blot experiments.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Myosin is composed of six polypeptide chains: two identical heavy chains and two pairs of light chains. Myosin light chain 2 (MLC2), also known as myosin regulatory light chain (MRLC), RLC, or LC20, has many isoforms depending on its distribution. In smooth muscle, MLC2 is phosphorylated at Thr18 and Ser19 by myosin light chain kinase (MLCK) in a Ca2+/calmodulin-dependent manner (1). This phosphorylation is correlated with myosin ATPase activity and smooth muscle contraction (2). ROCK also phosphorylates Ser19 of smooth muscle MLC2, which regulates the assembly of stress fibers (3). Phosphorylation of smooth muscle MLC2 at Ser1/Ser2 and Ser9 by PKC and cdc2 has been reported to inhibit myosin ATPase activity (4,5). Phosphorylation by cdc2 controls the timing of cytokinesis (5). Transgenic mice lacking phosphorylation sites on the cardiac muscle isoform show morphological and functional abnormalities (6).

  1. Ikebe, M. and Hartshorne, D.J. (1985) J. Biol. Chem. 260, 10027-10031.
  2. Tan, J. L. et al. (1992) Annu. Rev. Biochem. 61, 721-759.
  3. Totsukawa, G. et al. (2000) J. Cell Biol. 150, 797-806.
  4. Ikebe, M. et al. (2000) J. Biol. Chem. 262, 9569-9573.
  5. Satterwhite, L. L. et al. (1992) J. Cell Biol. 118, 595-605.
  6. Sanbe, A. et al. (1999) J. Biol. Chem. 274, 21085-21094.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

    使用に関する制限

    法的な権限を与えられたCSTの担当者が署名した書面によって別途明示的に合意された場合を除き、 CST、その関連会社または代理店が提供する製品には以下の条件が適用されます。お客様が定める条件でここに定められた条件に含まれるものを超えるもの、 または、ここに定められた条件と異なるものは、法的な権限を与えられたCSTの担当者が別途書面にて受諾した場合を除き、拒絶され、 いかなる効力も効果も有しません。

    研究専用 (For Research Use Only) またはこれに類似する表示がされた製品は、 いかなる目的についても FDA または外国もしくは国内のその他の規制機関により承認、認可または許可を受けていません。 お客様は製品を診断もしくは治療目的で使用してはならず、また、製品に表示された内容に違反する方法で使用してはなりません。 CST が販売または使用許諾する製品は、エンドユーザーであるお客様に対し、使途を研究および開発のみに限定して提供されるものです。 診断、予防もしくは治療目的で製品を使用することまたは製品を再販売 (単独であるか他の製品等の一部であるかを問いません) もしくはその他の商業的利用の目的で購入することについては、CST から別途許諾を得る必要があります。 お客様は以下の事項を遵守しなければなりません。(a) CST の製品 (単独であるか他の資材と一緒であるかを問いません) を販売、使用許諾、貸与、寄付もしくはその他の態様で第三者に譲渡したり使用させたりしてはなりません。また、商用の製品を製造するために CST の製品を使用してはなりません。(b) 複製、改変、リバースエンジニアリング、逆コンパイル、 分解または他の方法により製品の構造または技術を解明しようとしてはなりません。また、 CST の製品またはサービスと競合する製品またはサービスを開発する目的で CST の製品を使用してはなりません。(c) CST の製品の商標、商号、ロゴ、特許または著作権に関する通知または表示を除去したり改変したりしてはなりません。(d) CST の製品をCST 製品販売条件(CST’s Product Terms of Sale) および該当する書面のみに従って使用しなければなりません。(e) CST の製品に関連してお客様が使用する第三者の製品またはサービスに関する使用許諾条件、 サービス提供条件またはこれに類する合意事項を遵守しなければなりません。

    Revision 1
    #9776

    Myosin Light Chain 2 Antibody Sampler Kit

    Myosin Light Chain 2 Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image

    Simple Western™ analysis of lysates (0.1 mg/mL) from C2C12 cells using Phospho-Myosin Light Chain 2 (Thr18/Ser19) Antibody #3674. The virtual lane view (left) shows the target band (as indicated) at 1:10 and 1:50 dilutions of primary antibody. The corresponding electropherogram view (right) plots chemiluminescence by molecular weight along the capillary at 1:10 (blue line) and 1:50 (green line) dilutions of primary antibody. This experiment was performed under reducing conditions on the Jess™ Simple Western instrument from ProteinSimple, a BioTechne brand, using the 2 – 40 kDa separation module.

    Myosin Light Chain 2 Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    Western blot analysis of extracts from HeLa cells, vehicle-treated (-) or treated with the myosin light chain kinase inhibitor ML-7 (50μM, 15 min; +) using Phospho-Myosin Light Chain 2 (Ser19) Antibody (upper) or Myosin Light Chain 2 (D18E2) Rabbit mAb #8505 (lower).
    Myosin Light Chain 2 Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    Western blot analysis of extracts from HeLa cells, vehicle-treated (-) or treated with the myosin light chain kinase inhibitor ML-7 (50μM, 15 min; +) using Phospho-Myosin Light Chain 2 (Thr18/Ser19) Antibody (upper) or Myosin Light Chain 2 (D18E2) Rabbit mAb #8505 (lower).
    Myosin Light Chain 2 Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    After the primary antibody is bound to the target protein, a complex with HRP-linked secondary antibody is formed. The LumiGLO® is added and emits light during enzyme catalyzed decomposition.
    Myosin Light Chain 2 Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    Western blot analysis of extracts from various cell lines using Myosin Light Chain 2 (D18E2) Rabbit mAb.
    Myosin Light Chain 2 Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    Confocal immunofluorescent images of HeLa cells, untreated (left) or phosphatase-treated (right), labeled with Phospho-Myosin Light Chain 2 (Ser19) Antibody (green). Actin filaments have been labeled with Alexa Fluor® 555 phalloidin (red). Blue pseudocolor = DRAQ5® #4084 (fluorescent DNA dye).