Revision 1

#25314Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

130

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#O75113

Entrez-Gene Id:

9683

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:100

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/mL BSA, 50% glycerol, and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

N4BP1 (E8H5E) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total N4BP1 protein.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Glu405 of human N4BP1 protein.

Background

N4BP1 (NEDD4-binding protein 1) was identified as a binding partner and substrate for the HECT domain-containing ubiquitin ligase NEDD4 (1). Subsequently, it was also found to interact with Itch, a ubiquitin ligase structurally similar to NEDD4 (2). Interaction between N4BP1 interferes with the ability of Itch to bind its substrates, including c-Jun and p63 (2). N4BP1 expression has been associated with immune regulation as well as cancer. N4BP1 was identified as an inhibitory factor of NF-κB-mediated MHC-1 expression in neuroblastoma and high expression of N4BP1 was linked to poor overall survival (3). Studies have also found that N4BP1 is a suppressor of cytokine production that can be cleaved and inactivated by caspase-8 (4). N4BP1 can interact with the NF-κB modulator NEMO to suppress NF-κB transcriptional activity (5). Studies have also identified N4BP1 as a potent interferon-inducible HIV-1 restriction factor that targets the degradation of viral mRNA (6).

  1. Murillas, R. et al. (2002) J Biol Chem 277, 2897-907.
  2. Oberst, A. et al. (2007) Proc Natl Acad Sci U S A 104, 11280-5.
  3. Spel, L. et al. (2018) Cancer Res 78, 6621-6631.
  4. Gitlin, A.D. et al. (2020) Nature 587, 275-280.
  5. Shi, H. et al. (2021) Nat Commun 12, 1379.
  6. Yamasoba, D. et al. (2019) Nat Microbiol 4, 1532-1544.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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Revision 1
#25314

N4BP1 (E8H5E) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: N4BP1 (E8H5E) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from 293T cells, mock transfected (-) or transfected with a construct expressing Myc/DDK-tagged full-length human N4BP1 (hN4BP1-Myc/DDK; +), using N4BP1 (E8H5E) Rabbit Ab (upper) or GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower).
Western Blotting Image 2: N4BP1 (E8H5E) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cells using N4BP1 (E8H5E) Rabbit mAb (upper) or GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower). Low expression of N4BP1 protein in MG-63 and OVSAHO cells is consistent with the predicted expression pattern.
Immunoprecipitation Image 1: N4BP1 (E8H5E) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of N4BP1 protein from COV434 cell extracts. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, and lane 3 is N4BP1 (E8H5E) Rabbit mAb. Western blot analysis was performed using N4BP1 (E8H5E) Rabbit mAb. Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 was used as a secondary antibody.