Revision 1

#89883Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, ChIP

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

30

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#Q8IXP5

Entrez-Gene Id:

341032

Product Information

Product Usage Information

For optimal ChIP results, use 10 μl of antibody and 10 μg of chromatin (approximately 4 × 106 cells) per IP. This antibody has been validated using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kits.
Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Chromatin IP 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/mL BSA, 50% glycerol, and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

OCA-T1 (E4A8S) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total OCA-T1 protein.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Pro150 of human OCA-T1 protein.

Background

OCA-T1 is encoded by the gene POU2AF2 (C11orf53), which was identified in a single-cell RNA sequencing study to be expressed selectively in tuft cells from mouse and human tissues (1). The expression of OCA-T1 was observed to occur in a pattern strikingly similar to that of POU2F3, a master regulator of tuft cell development whose expression also defines a tuft cell-like variant (SCLC-P) of small cell lung cancers (2). Although containing no recognizable structural domains, OCA-T1 showed minor sequence similarity with OCA-B, a protein encoded by the POU2AF1 gene and reported to be an activator of selected Class II POU domain transcription factors (3). Functional studies revealed that OCA-T1 forms a protein complex with POU2F3; these proteins furthermore share genomic binding sites and promote the expression of genes directly associated with tuft cell development. Lastly, Crispr/Cas9-mediated deletion of POU2AF2 in mice revealed that OCA-T1 is functionally required for normal tuft cell development (1). Collectively, these findings suggest that OCA-T1 is a critical component of the POU2F3-containing transcriptional complex that regulates the expression of genes governing tuft cell development.

  1. Wu, X.S. et al. (2022) Nature 607, 169-175.
  2. Huang, Y.H. et al. (2018) Genes Dev 32, 915-928.
  3. Luo, Y. et al. (1992) Cell 71, 231-41.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation ChIP: Chromatin IP

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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Revision 1
#89883

OCA-T1 (E4A8S) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: OCA-T1 (E4A8S) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from COR-L311, NCI-H526, and HeLa cells using OCA-T1 (E4A8S) Rabbit mAb (upper) or GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower).
Immunoprecipitation Image 1: OCA-T1 (E4A8S) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of OCA-T1 protein from NCI-H526 cell extracts. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, and lane 3 is OCA-T1 (E4A8S) Rabbit mAb. Western blot analysis was performed using OCA-T1 Antibody #20217. Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 was used as a secondary antibody.
Chromatin Immunoprecipitation Image 1: OCA-T1 (E4A8S) Rabbit mAb Expand Image
Chromatin immunoprecipitations were performed with cross-linked chromatin from NCI-H526 cells and either OCA-T1 (E4A8S) Rabbit mAb or Normal Rabbit IgG #2729, using SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005. The enriched DNA was quantified by real-time PCR, using human TRPM5 intron 4 primers, human ASCL2 upstream primers, human GFI1B upstream primers, and human IGFBP2 intron 1 primers. The amount of immunoprecipitated DNA in each sample is represented as signal relative to the total amount of input chromatin, which is equivalent to one.