Revision 1

#75463Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IF-IC, FC-FP

REACTIVITY:

H M

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

45

Source/Isotype:

Mouse IgG1

UniProt ID:

#Q01860

Entrez-Gene Id:

5460

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:200
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Oct-4 (D7O5Z) Mouse mAb recognizes endogenous levels of total Oct-4 protein. This antibody does not perform optimally on mouse cells in immunofluorescence assays.

Species Reactivity:

Human, Mouse

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Phe38 of human Oct-4 protein.

Background

Oct-4 (POU5F1) is a transcription factor highly expressed in undifferentiated embryonic stem cells and embryonic germ cells (1). A network of key factors that includes Oct-4, Nanog, and Sox2 is necessary for the maintenance of pluripotent potential, and downregulation of Oct-4 has been shown to trigger cell differentiation (2,3). Research studies have demonstrated that Oct-4 is a useful germ cell tumor marker (4). Oct-4 exists as two splice variants, Oct-4A and Oct-4B (5). Recent studies have suggested that the Oct-4A isoform has the ability to confer and sustain pluripotency, while Oct-4B may exist in some somatic, non-pluripotent cells (6,7).

  1. Looijenga, L.H. et al. (2003) Cancer Res 63, 2244-50.
  2. Pesce, M. and Schöler, H.R. (2001) Stem Cells 19, 271-278.
  3. Pan, G. and Thomson, J.A. (2007) Cell Res 17, 42-9.
  4. Cheng, L. et al. (2007) J Pathol 211, 1-9.
  5. Takeda, J. et al. (1992) Nucleic Acids Res 20, 4613-20.
  6. Cauffman, G. et al. (2006) Stem Cells 24, 2685-91.
  7. Lee, J. et al. (2006) J Biol Chem 281, 33554-65.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry) FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#75463

Oct-4 (D7O5Z) Mouse mAb

Western Blotting Image 1: Oct-4 (D7O5Z) Mouse mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from NTERA-2 and HeLa cells using Oct-4 (D7O5Z) Mouse mAb (upper) and GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower). As expected, HeLa cells are negative for Oct-4 expression.
Immunofluorescence Image 1: Oct-4 (D7O5Z) Mouse mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of NTERA-2 (left) and HeLa (right) cells using Oct-4 (D7O5Z) Mouse mAb (green). Actin filaments were labeled with DyLight 554 Phalloidin #13054 (red). As expected, HeLa cells are negative for Oct-4 expression.
Flow Cytometry Image 1: Oct-4 (D7O5Z) Mouse mAb Expand Image
Flow cytometric analysis of HeLa cells (blue) and NTERA cells (green) using Oct-4 (D7O5Z) Mouse mAb. Anti-mouse IgG (H+L), F(ab')2 fragment (Alexa Fluor 488 conjugate) #4408 was used as a secondary Ab.