Revision 1

#67589Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

80-100

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#O60313

Entrez-Gene Id:

4976

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:100
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:800

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

OPA1 (D7C1A) recognizes endogenous levels of total OPA1 protein.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with recombinant protein specific to a central region of human OPA1 protein.

Background

Changes in mitochondrial dynamics regulated by environmental cues affect mitochondrial size and shape and have been shown to dramatically impact mitochondrial metabolism, apoptosis, and autophagy (1). These processes are largely controlled by mitochondrial dynamin-related GTPases, including mitofusin-1, mitofusin-2, OPA1, and DRP1. DRP1 regulates mitochondrial fission, while the mitofusins and OPA1 control fusion at the outer and inner mitochondrial membrane, respectively.

OPA1, or Optic Atrophy 1, was originally identified as a genetic cause for Autosomal Dominant Optic Atrophy, a neuropathy resulting in progressive visual loss (2,3). OPA1 is a widely expressed protein localized to the inner mitochondrial membrane, which regulates mitochondrial fusion and cristae morphology and protects against apoptosis (4-6). OPA1 activity is tightly regulated through alternative splicing and post-translational modifications including complex proteolytic processing by multiple proteases (7-12). In addition, OPA1 expression can be induced under conditions of metabolic demand through a pathway involving Parkin induced NF-κB activation (13).

  1. Kasahara, A. and Scorrano, L. (2014) Trends Cell Biol 24, 761-70.
  2. Delettre, C. et al. (2000) Nat Genet 26, 207-10.
  3. Alexander, C. et al. (2000) Nat Genet 26, 211-5.
  4. Frezza, C. et al. (2006) Cell 126, 177-89.
  5. Olichon, A. et al. (2003) J Biol Chem 278, 7743-6.
  6. Griparic, L. et al. (2004) J Biol Chem 279, 18792-8.
  7. Delettre, C. et al. (2001) Hum Genet 109, 584-91.
  8. Olichon, A. et al. (2007) Cell Death Differ 14, 682-92.
  9. Ishihara, N. et al. (2006) EMBO J 25, 2966-77.
  10. Cipolat, S. et al. (2006) Cell 126, 163-75.
  11. Griparic, L. et al. (2007) J Cell Biol 178, 757-64.
  12. Merkwirth, C. et al. (2008) Genes Dev 22, 476-88.
  13. Müller-Rischart, A.K. et al. (2013) Mol Cell 49, 908-21.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
SignalSilence is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#67589

OPA1 (D7C1A) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: OPA1 (D7C1A) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from MCF7 or HeLa cells, untreated (-) or treated with carbonyl cyanide 3-chlorophenylhydrazone (CCCP; +) using OPA1 (D7C1A) Rabbit mAb.
Western Blotting Image 2: OPA1 (D7C1A) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from HeLa cells, transfected with 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-), SignalSilence® OPA1 siRNA I (+), or SignalSilence® OPA1 siRNA II #89128 (+) using OPA1 (D7C1A) Rabbit mAb #67589 (upper) or β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (lower). The OPA1 (D7C1A) Rabbit mAb confirms silencing of OPA1 expression, while the β-Actin (D6A8) Rabbit mAb is used as a loading control.
Immunoprecipitation Image 1: OPA1 (D7C1A) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of OPA1 from MCF7 cell extracts. Lane 1 represents 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, and lane 3 is OPA1 (D7C1A) Rabbit mAb. Western blot was performed using OPA1 (D7C1A) Rabbit mAb. A conformation specific secondary antibody was used to avoid reactivity with IgG.
Immunofluorescence Image 1: OPA1 (D7C1A) Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of HeLa cells, mock-transfected (left) or transfected with SignalSilence® OPA1 siRNA II (right), using OPA1 (D7C1A) Rabbit mAb (green). Blue pseudocolor = DRAQ5® (fluorescent DNA dye).