Revision 6

#9532Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, W-S, IP, eCLIP

REACTIVITY:

H M R Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

116, 89

Source/Isotype:

Rabbit 

UniProt ID:

#P09874

Entrez-Gene Id:

142

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Simple Western™ 1:10 - 1:50
Immunoprecipitation 1:200
eCLIP 1:200
For more information about the RBP-eCLIP service please visit Eclipsebio.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

For a carrier free (BSA and azide free) version of this product see product #17245.

Specificity / Sensitivity

PARP (46D11) Rabbit mAb detects endogenous levels of total full-length PARP-1 and the large fragment (89 kDa) produced by caspase cleavage at Asp214. This antibody does not cross-react with PARP-2 and PARP-3.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat, Monkey

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Gly623 of human PARP-1.

Background

PARP, a 116 kDa nuclear poly (ADP-ribose) polymerase, appears to be involved in DNA repair in response to environmental stress (1). This protein can be cleaved by many ICE-like caspases in vitro (2,3) and is one of the main cleavage targets of caspase-3 in vivo (4,5). In human PARP, the cleavage occurs between Asp214 and Gly215, which separates the PARP amino-terminal DNA-binding domain (24 kDa) from the carboxy-terminal catalytic domain (89 kDa) (2,4). PARP helps cells to maintain their viability; cleavage of PARP facilitates cellular disassembly and serves as a marker of cells undergoing apoptosis (6).

  1. Satoh, M.S. and Lindahl, T. (1992) Nature 356, 356-358.
  2. Lazebnik, Y. A. et al. (1994) Nature 371, 346-347.
  3. Cohen, G.M. (1997) Biochem. J. 326, 1-16.
  4. Nicholson, D. W. et al. (1995) Nature 376, 37-43.
  5. Tewari, M. et al. (1995) Cell 81, 801-809.
  6. Oliver, F.J. et al. (1998) J. Biol. Chem. 273, 33533-33539.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v nonfat dry milk, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting W-S: Simple Western™ IP: Immunoprecipitation eCLIP: eCLIP

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
Alexa Fluor is a registered trademark of Life Technologies Corporation.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 6
#9532

PARP (46D11) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: PARP (46D11) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from control HEK293 cells (lane 1) or PARP knockout HEK293 cells (lane 2) using PARP (46D11) Rabbit mAb #9532 (upper) or β-actin (13E5) Rabbit mAb #4970 (lower). The absence of signal in the PARP knockout HEK293 cells confirms the specificity of the antibody for PARP.
Western Blotting Image 2: PARP (46D11) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from THP-1 cells, untreated or treated with TNF-α and cycloheximide as well as control extracts from SW620 and A20 cell lines, using PARP (46D11) Rabbit mAb.
Western Blotting Image 1: PARP (46D11) Rabbit mAb Expand Image
Simple Western™ analysis of lysates (1 mg/mL) from Jurkat cells treated with Etoposide (25 uM, 5 hours) using PARP (46D11) Rabbit mAb #9532. The virtual lane view (left) shows the target bands (as indicated) at 1:10 and 1:50 dilutions of primary antibody. The corresponding electropherogram view (right) plots chemiluminescence by molecular weight along the capillary at 1:10 (blue line) and 1:50 (green line) dilutions of primary antibody. This experiment was performed under reducing conditions on the Jess™ Simple Western instrument from ProteinSimple, a BioTechne brand, using the 12-230 kDa separation module.
No image available
eCLIP Image 1: PARP (46D11) Rabbit mAb Expand Image
Enhanced cross-linking and immunoprecipitation (eCLIP) was performed with RNA from K-562 cells and PARP (46D11) Rabbit mAb using a protocol based on the RBP-eCLIP method from Eclipsebio. The figure shows binding across the GET4 transcript. Data is kindly provided by the laboratory of Dr. Gene Yeo and used with permission.