Revision 1

#3901Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, FC-FP

REACTIVITY:

H M

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

160 (Bcr); 210 (Bcr-Abl)

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#P11274

Entrez-Gene Id:

613

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:100

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Phospho-Bcr (Tyr177) Antibody detects endogenous levels of Bcr and Bcr-Abl only when phosphorylated at tyrosine 177.

Species Reactivity:

Human, Mouse

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic phosphopeptide corresponding to residues surrounding Tyr177 of human Bcr. Antibodies are purified by protein A and peptide affinity chromatography.

Background

The Bcr gene was orginally identified by its presence in the chimeric Bcr-Abl oncogene (1). The amino-terminal region of Bcr contains an oligomerization domain, a serine/threonine kinase domain, and a region that binds SH2 domains. The middle of the protein has a PH domain and a region of sequence similarity to the guanine nucleotide exchange factors for the Rho family of GTP binding proteins. The carboxy-terminal region may be involved in a GTPase activating function for the small GTP-binding protein Rac (2,3). The function of wild type Bcr in cells remains unclear. PDGF receptor may use Bcr as a downstream signaling mediator (4). Research studies have shown that the Bcr-Abl fusion results in production of a constitutively active tyrosine kinase, which causes chronic myelogenous leukemia (CML) (5). Tyr177 of Bcr is phosphorylated in the Bcr-Abl fusion protein, which plays an important role in transforming the activity of Bcr-Abl (6). Phosphorylated Tyr177 provides a docking site for Gab2 and GRB2 (7,8).

  1. Groffen, J. et al. (1984) Cell 36, 93-99.
  2. Maru, Y. et al. (1991) Cell 67, 459-468.
  3. Che, W. et al. (2001) Circulation 104, 1399-1406.
  4. Abe, J. I. et al. (2001) Ann. N.Y. Acad. Sci. 947, 341-343.
  5. Voncken, J. W. et al. (1995) Cell 80, 719-728.
  6. He, Y. et al. (2002) Blood 99, 2957-2968.
  7. Sattler, M. et al. (2002) Cancer Cell 1, 479-492.
  8. Warmuth, M. et al. (1995) J. Biol. Chem. 272, 33260-33270.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#3901

Phospho-Bcr (Tyr177) Antibody

Western Blotting Image 1: Phospho-Bcr (Tyr177) Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from K562 cells, untreated or calf intestinal phosphatase (CIP)-treated, using Phospho-Bcr (Tyr177) Antibody (upper) or Bcr Antibody #3902 (lower).
Western Blotting Image 2: Phospho-Bcr (Tyr177) Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from PAE/CKR cells (expressing chimeric receptors of the extracellular domain of CSF-1R, and transmembrane and cytoplasmic domains of KDR) stimulated with CSF-1 (40 ng/ml for 5 minutes) or NIH/3T3 cells stimulated with PDGF (40 ng/ml for 2 minutes) using Phospho-Bcr (Tyr177) Antibody (upper) or Bcr Antibody #3902 (lower).
Flow Cytometry Image 1: Phospho-Bcr (Tyr177) Antibody Expand Image
Flow cytometric analysis of K562 cells, untreated (green) or Gleevec® (STI571)- treated (blue), using Phospho-Bcr (Tyr177) Antibody compared to a nonspecific negative control antibody (red).