Revision 1
Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, E-P

REACTIVITY:

All

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

Source/Isotype:

Rabbit IgG

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Peptide ELISA (DELFIA) 1:1000

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Phospho-PKA Substrate (RRXS*/T*) (100G7E) Rabbit mAb detects peptides and proteins containing a phospho-Ser/Thr residue with arginine at the -3 and -2 positions. It is a useful tool in identifying new substrates of PKA. The antibody recognizes other -3 arginine-bearing phospho-Ser/Thr peptides, such as substrate motifs for Akt and PKC, to a lesser extent. It does not recognize the nonphosphorylated substrate motif peptides. (U.S. Patent No's.: 6,441,140; 6,982,318; 7,259,022; 7,344,714; U.S.S.N. 11,484,485; and all foreign equivalents.)

Species Reactivity:

All Species Expected

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with synthetic phospho-PKA substrate peptides .

Background

An important class of kinases, refered to as Arg-directed kinases or AGC-family kinases, includes cAMP-dependent protein kinase (PKA), cGMP-dependent protein kinase (PKG), protein kinase C, Akt and RSK. These kinases share a substrate specificity characterized by Arg at position -3 relative to the phosphorylated Ser or Thr (1,2). Phospho-PKA substrate-specific antibodies from Cell Signaling Technology are powerful tools for investigating the regulation of phosphorylation by PKA and other Arg-directed kinases, as well as for high throughput kinase drug discovery.

  1. Montminy, M. (1997) Annu Rev Biochem 66, 807-22.
  2. Pearson, R.B. and Kemp, B.E. (1991) Methods Enzymol 200, 62-81.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation E-P: Peptide ELISA (DELFIA)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#9624

Phospho-PKA Substrate (RRXS*/T*) (100G7E) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: Phospho-PKA Substrate (RRXS*/T*) (100G7E) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from serum-starved A431 cells, phosphorylated in vitro with PKA kinase or treated in culture with forskolin/IBMX, using Phospho-PKA Substrate (RRXS*/T*) (100G7E) Rabbit mAb. Lysis buffer: 1.0% Triton X-100 (lanes 1 and 2), 2.0% SDS (lanes 3 and 4).
No image available
Product Image 1: Phospho-PKA Substrate (RRXS*/T*) (100G7E) Rabbit mAb Expand Image
Phospho-PKA Substrate (RRXS*/T*) (100G7E) Rabbit mAb ELISA Assay: Signal-to-noise ratio of phospho- versus nonphospho-peptides. (T* and S* denote phosphorylated threonine and serine.)