Revision 5
Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC, FC-FP

REACTIVITY:

H M R Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

43

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P08559, #P29803

Entrez-Gene Id:

5160, 5161

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:400 - 1:1600
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:400 - 1:1600

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

For a carrier free (BSA and azide free) version of this product see product #48447.

Specificity / Sensitivity

Phospho-Pyruvate Dehydrogenase α1 (Ser293) (E4V9L) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of pyruvate dehydrogenase α1 protein only when phosphorylated at Ser293. Based on amino acid sequence comparisons, this antibody is predicted to detect endogenous levels of pyruvate dehydrogenase α2 protein only when phosphorylated at Ser291 residue.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat, Monkey

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic phosphopeptide corresponding to residues surrounding Ser293 of human pyruvate dehydrogenase α1 protein.

Background

The pyruvate dehydrogenase complex catalyzes the conversion of pyruvate and CoA into acetyl-CoA and CO2 in the presence of NAD+. Acetyl-CoA then goes into the citric acid cycle where it reacts with oxaloacetate to form citrate. The reaction of oxidative decarboxylation of pyruvate serves as a critical link between glycolysis and the citric acid cycle. In mammalian cells, the pyruvate dehydrogenase complex is located in the mitochondrial matrix (1). This complex is composed of three enzymes: pyruvate dehydrogenase (E1), dihydrolipoamide acetyltransferase (E2), and dihydrolipoamide dehydrogenase (E3). Pyruvate dehydrogenase (E1) consists of two subunits: α and β. This enzyme catalyzes the removal of CO2 from pyruvate. Mutations in the α subunits of pyruvate dehydrogenase (E1) lead to congenital defects that are usually associated with lactic acidosis, neurodegeneration, and early death (2).

Pyruvate dehydrogenase kinase 1 phosphorylates pyruvate dehydrogenase (E1) α1 subunit at Ser293 to inactivate its activity (3,4). This phosphorylation contributes to the tumor metabolic reprogramming toward glycolysis in hypoxia by inhibiting the citric acid cycle (4).

  1. Strumiło, S. (2005) Acta Biochim Pol 52, 759-64.
  2. Stacpoole, P.W. et al. (2003) Curr Gene Ther 3, 239-45.
  3. Fan, J. et al. (2014) J Biol Chem 289, 26533-41.
  4. Chae, Y.C. et al. (2016) Cancer Cell 30, 257-72.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry) FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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