Revision 3

#9301Store at -20C

Cell Signaling Technology

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP

REACTIVITY:

H Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

110

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#P06400

Entrez-Gene Id:

5925

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Phospho-Rb (Ser795) Antibody detects endogenous levels of Rb only when phosphorylated at Ser795. The antibody does not cross-react with Rb phosphorylated at other sites.

Species Reactivity:

Human, Monkey

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic phosphopeptide corresponding to residues surrounding Ser795 of human Rb. Antibodies are purified by protein A and peptide affinity chromatography.

Background

The retinoblastoma tumor suppressor protein Rb regulates cell proliferation by controlling progression through the restriction point within the G1-phase of the cell cycle (1). Rb has three functionally distinct binding domains and interacts with critical regulatory proteins including the E2F family of transcription factors, c-Abl tyrosine kinase, and proteins with a conserved LXCXE motif (2-4). Cell cycle-dependent phosphorylation by a CDK inhibits Rb target binding and allows cell cycle progression (5). Rb inactivation and subsequent cell cycle progression likely requires an initial phosphorylation by cyclin D-CDK4/6 followed by cyclin E-CDK2 phosphorylation (6). Specificity of different CDK/cyclin complexes has been observed in vitro (6-8) and cyclin D1 is required for Ser780 phosphorylation in vivo (9).

  1. Sherr, C.J. (1996) Science 274, 1672-7.
  2. Nevins, J.R. (1992) Science 258, 424-9.
  3. Welch, P.J. and Wang, J.Y. (1993) Cell 75, 779-90.
  4. Hu, Q.J. et al. (1990) EMBO J 9, 1147-55.
  5. Knudsen, E.S. and Wang, J.Y. (1997) Mol Cell Biol 17, 5771-83.
  6. Lundberg, A.S. and Weinberg, R.A. (1998) Mol Cell Biol 18, 753-61.
  7. Connell-Crowley, L. et al. (1997) Mol Biol Cell 8, 287-301.
  8. Kitagawa, M. et al. (1996) EMBO J 15, 7060-9.
  9. Geng, Y. et al. (2001) Proc Natl Acad Sci USA 98, 194-9.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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