Revision 4
Cell Signaling Technology

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

70

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P19484

Entrez-Gene Id:

7942

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Phospho-TFEB (Ser211) (E9S8N) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of TFEB protein only when phosphorylated at Ser211.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic phospho-peptide corresponding to residues surrounding Ser211 of human TFEB protein.

Background

Transcription factor EB (TFEB) is a member of the Myc-related, bHLH leucine-zipper family of transcription factors that drives the expression of a network of genes known as the Coordinated Lysosomal Expression and Regulation (CLEAR) network (1,2). TFEB specifically recognizes and binds regulatory sequences within the CLEAR box (GTCACGTGAC) of lysosomal and autophagy genes, resulting in the upregulated expression of genes involved in lysosome biogenesis and function, and regulation of autophagy (1,2). TFEB is activated in response to nutrient deprivation, stimulating translocation to the nucleus where it forms homo- or heterooligomers with other members of the microphthalmia transcription factor (MiTF) subfamily and resulting in upregulation of autophagosomes and lysosomes (3-5). Recently, it has been shown that TFEB is a component of mammalian target of rapamycin (mTOR) complex 1 (mTORC1), which regulates the phosphorylation and nuclear translocation of TFEB in response to cellular starvation and stress (6-9). During normal growth conditions, TFEB is phosphorylated at Ser211 in an mTORC1-dependent manner. Phosphorylation promotes association of TFEB with 14-3-3 family proteins and retention in the cytosol. Inhibition of mTORC1 results in a loss of TFEB phosphorylation, dissociation of the TFEB/14-3-3 complex, and rapid transport of TFEB to the nucleus where it increases transcription of CLEAR and autophagy genes (10). TFEB has also been shown to be activated in a nutrient-dependent manner by p42 MAP kinase (Erk2). TFEB is phosphorylated at Ser142 by Erk2 in response to nutrient deprivation, resulting in nuclear localization and activation, and indicating that pathways other than mTOR contribute to nutrient sensing via TFEB (3).

  1. Sardiello, M. et al. (2009) Science 325, 473-7.
  2. Sardiello, M. and Ballabio, A. (2009) Cell Cycle 8, 4021-2.
  3. Settembre, C. et al. (2011) Science 332, 1429-33.
  4. David, R. (2011) Nat Rev Mol Cell Biol 12, 404.
  5. Cuervo, A.M. (2011) Science 332, 1392-3.
  6. Peña-Llopis, S. et al. (2011) EMBO J 30, 3242-58.
  7. Settembre, C. and Ballabio, A. (2011) Autophagy 7, 1379-81.
  8. Peña-Llopis, S. and Brugarolas, J. (2011) Cell Cycle 10, 3987-8.
  9. Settembre, C. et al. (2012) EMBO J 31, 1095-108.
  10. Martina, J.A. et al. (2012) Autophagy 8, 903-14.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v nonfat dry milk, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

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