Revision 1

#4553Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

72 TNK1, 58 TNK1-C17orf61

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#Q13470

Entrez-Gene Id:

8711

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Phospho-TNK1 (Tyr277) Antibody detects endogenous levels of TNK1 protein only when phosphorylated at Tyr277. This antibody may cross-react with tyrosine phosphorylated EGF receptor.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic phosphopeptide corresponding to the sequence around Tyr277 of human TNK1. Antibodies are purified by protein A and peptide affinity chromatography.

Background

Tyrosine kinase non-receptor 1 (TNK1) is related to the Ack1 (TNK2) non-receptor kinase that binds cdc42 and inhibits GTPase activity of this cell cycle regulator. TNK1 is broadly expressed in embryogenic tissues and leukemia cell lines, but is restricted to select adult tissues (1). TNK1 is a putative 72 kDa protein comprised of an N-terminal kinase domain, a central SH3 domain and a proline-rich tail. Interaction with PLCγ in vitro indicates a possible role in phospholipid signal transduction pathways (2). Though the exact mechanism is currently unclear, active TNK1 may play a role in regulating cell death by preventing TNF-α-induced NF-κB transactivation (3).
Phosphorylation of TNK1 on Tyr277 was identified at Cell Signaling Technology (CST) using PhosphoScan®, CST's LC-MS/MS platform for phosphorylation site discovery (4) and also reported independently in another publication using MS technology (5). Phosphorylation of TNK1 at Tyr277 was observed in select carcinoma cell lines and in tumors. A constitutively active, truncated TNK1 kinase resulting from fusion between the TNK1 and C17orf61 genes is seen in some cells (5). For additional information visit PhosphoSitePlus™, CST's modification site knowledgebase, at www.phosphosite.org.

  1. Hoehn, G.T. et al. (1996) Oncogene 12, 903-13.
  2. Felschow, D.M. et al. (2000) Biochem Biophys Res Commun 273, 294-301.
  3. Azoitei, N. et al. (2007) Oncogene 26, 6536-45.
  4. Rush, J. et al. (2005) Nat Biotechnol 23, 94-101.
  5. Gu, T.L. et al. (2010) Leukemia 24, 861-5.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#4553

Phospho-TNK1 (Tyr277) Antibody

Western Blotting Image 1: Phospho-TNK1 (Tyr277) Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from L-540 cells using Phospho-TNK1 (Tyr277) Antibody (upper and middle) or TNK1 (C44F9) Rabbit mAb #4570 (lower). The middle membrane was treated with calf intestinal alkaline phosphatase (CIP) before antibody probing. L-540 cells express a 58 kDa TNK1-C17orf61 fusion protein containing 466 amino acids from the amino terminus of TNK1 [Gu, T.L. et al. (2010) Leukemia, in press]. TNK1 kinase was constitutively activated in these cells.