Revision 6

#5432Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IHC-P, eCLIP

REACTIVITY:

H M R Mk Dm

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

32

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P63244

Entrez-Gene Id:

10399

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Immunohistochemistry (Paraffin) 1:400 - 1:1600
eCLIP 1:200
For more information about the RBP-eCLIP service please visit Eclipsebio.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

For a carrier free (BSA and azide free) version of this product see product #37124.

Specificity / Sensitivity

RACK1 (D59D5) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total RACK1 protein.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat, Monkey, D. melanogaster

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to central residues of human RACK1 protein.

Background

The highly conserved receptor for activated C kinase 1 (RACK1), homologous to the β subunit of heterotrimeric G-proteins, was originally identified through its binding of active PKCβII and other classical PKC isoforms (1). RACK1 is a scaffold protein that recruits PKC and a wide range of other proteins to specific subcellular locations, promoting the formation of multiprotein complexes to induce and integrate various signaling pathways (reviewed in 2). One example of this is its enhancement of PKC-dependent JNK activation (3). RACK1 protein also resides in the eukaryotic ribosome, suggesting the possibility that RACK1 participates in the assembly of signaling complexes that regulate translation as well (reviewed in 4). RACK1 binds the SH2 domain of Src, and phosphorylation of RACK1 by Src occurs at Tyr228 after PKC activation (5).

  1. Ron, D. et al. (1994) Proc Natl Acad Sci U S A 91, 839-43.
  2. López-Bergami, P. et al. (2005) Mol Cell 19, 309-20.
  3. McCahill, A. et al. (2002) Mol Pharmacol 62, 1261-73.
  4. Nilsson, J. et al. (2004) EMBO Rep 5, 1137-41.
  5. Chang, B.Y. et al. (2002) Oncogene 21, 7619-29.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v nonfat dry milk, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IHC-P: Immunohistochemistry (Paraffin) eCLIP: eCLIP

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

使用に関する制限

法的な権限を与えられたCSTの担当者が署名した書面によって別途明示的に合意された場合を除き、 CST、その関連会社または代理店が提供する製品には以下の条件が適用されます。お客様が定める条件でここに定められた条件に含まれるものを超えるもの、 または、ここに定められた条件と異なるものは、法的な権限を与えられたCSTの担当者が別途書面にて受諾した場合を除き、拒絶され、 いかなる効力も効果も有しません。

研究専用 (For Research Use Only) またはこれに類似する表示がされた製品は、 いかなる目的についても FDA または外国もしくは国内のその他の規制機関により承認、認可または許可を受けていません。 お客様は製品を診断もしくは治療目的で使用してはならず、また、製品に表示された内容に違反する方法で使用してはなりません。 CST が販売または使用許諾する製品は、エンドユーザーであるお客様に対し、使途を研究および開発のみに限定して提供されるものです。 診断、予防もしくは治療目的で製品を使用することまたは製品を再販売 (単独であるか他の製品等の一部であるかを問いません) もしくはその他の商業的利用の目的で購入することについては、CST から別途許諾を得る必要があります。 お客様は以下の事項を遵守しなければなりません。(a) CST の製品 (単独であるか他の資材と一緒であるかを問いません) を販売、使用許諾、貸与、寄付もしくはその他の態様で第三者に譲渡したり使用させたりしてはなりません。また、商用の製品を製造するために CST の製品を使用してはなりません。(b) 複製、改変、リバースエンジニアリング、逆コンパイル、 分解または他の方法により製品の構造または技術を解明しようとしてはなりません。また、 CST の製品またはサービスと競合する製品またはサービスを開発する目的で CST の製品を使用してはなりません。(c) CST の製品の商標、商号、ロゴ、特許または著作権に関する通知または表示を除去したり改変したりしてはなりません。(d) CST の製品をCST 製品販売条件(CST’s Product Terms of Sale) および該当する書面のみに従って使用しなければなりません。(e) CST の製品に関連してお客様が使用する第三者の製品またはサービスに関する使用許諾条件、 サービス提供条件またはこれに類する合意事項を遵守しなければなりません。

Revision 6
#5432

RACK1 (D59D5) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: RACK1 (D59D5) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell types using RACK1 (D59D5) Rabbit mAb.
Immunoprecipitation Image 1: RACK1 (D59D5) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of RACK1 from HeLa cell lysates using RACK1 (D59D5) Rabbit mAb. Western blot was performed using the same antibody.
Immunohistochemistry Image 1: RACK1 (D59D5) Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human urothelial carcinoma using RACK1 (D59D5) Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 2: RACK1 (D59D5) Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human endometrioid carcinoma using RACK1 (D59D5) Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 3: RACK1 (D59D5) Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human B-cell non-Hodgkin lymphoma using RACK1 (D59D5) Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 4: RACK1 (D59D5) Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded normal human pancreas using RACK1 (D59D5) Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 5: RACK1 (D59D5) Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded normal human thymus using RACK1 (D59D5) Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 6: RACK1 (D59D5) Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded normal human salivary gland using RACK1 (D59D5) Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 7: RACK1 (D59D5) Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded 4T1 syngeneic tumor using RACK1 (D59D5) Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 8: RACK1 (D59D5) Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded mouse kidney using RACK1 (D59D5) Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 9: RACK1 (D59D5) Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded mouse testis using RACK1 (D59D5) Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 10: RACK1 (D59D5) Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded mouse thymus using RACK1 (D59D5) Rabbit mAb.
Immunohistochemistry Image 11: RACK1 (D59D5) Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human urothelial carcinoma using RACK1 (D59D5) Rabbit mAb (left) compared to concentration-matched Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (right).
eCLIP Image 1: RACK1 (D59D5) Rabbit mAb Expand Image
Enhanced cross-linking and immunoprecipitation (eCLIP) was performed with RNA from Hep G2 cells and RACK1 (D59D5) Rabbit mAb using a protocol based on the RBP-eCLIP method from Eclipsebio. The figure shows binding across the FAM120B transcript. Data is kindly provided by the laboratory of Dr. Gene Yeo and used with permission.