Revision 1

#2267Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC, FC-FP

REACTIVITY:

H Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

70

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#P27694

Entrez-Gene Id:

6117

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:50
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:25

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

RPA70 antibody detects endogenous levels of total RPA70 subunit.

Species Reactivity:

Human, Monkey

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to amino acids near the amino terminus of human RPA70. Antibodies are purified by protein A and peptide affinity chromatography.

Background

RPA70 (HSSB, REPA1, RF-A, RP-A, p70) is a component of a heterotrimeric complex, composed of 70, 32/30, and 14 kDa subunits, collectively known as RPA. RPA is a single-stranded DNA binding protein, whose DNA binding activity is believed to reside entirely in the 70 kDa subunit. The complex is required for almost all aspects of cellular DNA metabolism such as DNA replication (1-3), recombination, cell cycle and DNA damage checkpoints, and all major types of DNA repair including nucleotide excision, base excision, mismatch, and double-strand break repairs (4-7). In response to genotoxic stress in eukaryotic cells, RPA has been shown to associate with the Rad9/Rad1/Hus1 (9-1-1) checkpoint complex (8). RPA is hyperphosphorylated upon DNA damage or replication stress by checkpoint kinases including ataxia telangiectasia mutated (ATM), ATM and Rad3-related (ATR), and DNA-dependent protein kinase (DNA-PK) (9-11). Phosphorylation of RPA32 occurs at serines 4, 8, and 33 (11). Hyperphosphorylation may alter RPA-DNA and RPA-protein interactions. In addition to the checkpoint partners, RPA interacts with a wide variety of protein partners, including proteins required for normal replication such as RCF, PCNA, and Pol α, and also proteins involved in SV40 replication, such as DNA polymerase I and SV40 large T antigen (10,12).

  1. Liu, V.F. and Weaver, D.T. (1993) Mol. Cell Biol. 13, 7222-31.
  2. Wobbe, C.R. et al. (1987) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84, 1834-8.
  3. Fairman, M.P. and Stillman, B. (1988) EMBO J. 7, 1211-8.
  4. Wold, M.S. and Kelly, T. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85, 2523-7.
  5. Zhou, B.B. and Elledge, S.J. (2000) Nature 408, 433-9.
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  9. Wu, X. et al. (2005) Oncogene 24, 4728-35.
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  11. Nuss, J.E. et al. (2005) Biochemistry 44, 8428-37.
  12. Yuzhakov, A. et al. (1999) EMBO J. 18, 6189-99.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry) FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
Alexa Fluor is a registered trademark of Life Technologies Corporation.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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