Revision 3

#3102Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP

REACTIVITY:

H M R Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

52, 60

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#P84022, #Q15796

Entrez-Gene Id:

4088, 4087

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

SMAD2/3 Antibody detects endogenous levels of total SMAD2/3 protein.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat, Monkey

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues in the amino-terminal region of human SMAD2/3. Antibodies are purified by protein A and peptide affinity chromatography.

Background

Members of the SMAD family of signal transduction molecules are components of a critical intracellular pathway that transmit TGF-β signals from the cell surface into the nucleus. Three distinct classes of SMADs have been defined: the receptor-regulated SMADs (R-SMADs), which include SMAD1, 2, 3, 5, and 9; the common-mediator SMAD (co-SMAD), SMAD4; and the antagonistic or inhibitory SMADs (I-SMADs), SMAD6 and 7 (1-5). Activated type I receptors associate with specific R-SMADs and phosphorylate them on a conserved carboxy-terminal SSXS motif. The phosphorylated R-SMADs dissociate from the receptor and form a heteromeric complex with SMAD4, initiating translocation of the heteromeric SMAD complex to the nucleus. Once in the nucleus, SMADs recruit a variety of DNA binding proteins that function to regulate transcriptional activity (6-8).

Following stimulation by TGF-β, Smad2 and Smad3 become phosphorylated at their carboxyl termini (Ser465 and 467 on Smad2; Ser423 and 425 on Smad3) by TGF-β Receptor I. Phosphorylated Smad 2/3 can complex with Smad4, translocate to the nucleus and regulate gene expression (9-11).

  1. Heldin, C.H. et al. (1997) Nature 390, 465-71.
  2. Attisano, L. and Wrana, J.L. (1998) Curr Opin Cell Biol 10, 188-94.
  3. Derynck, R. et al. (1998) Cell 95, 737-40.
  4. Massagué, J. (1998) Annu Rev Biochem 67, 753-91.
  5. Whitman, M. (1998) Genes Dev 12, 2445-62.
  6. Wrana, J.L. (2000) Sci STKE 2000, re1.
  7. Attisano, L. and Wrana, J.L. (2002) Science 296, 1646-7.
  8. Moustakas, A. et al. (2001) J Cell Sci 114, 4359-69.
  9. Abdollah, S. et al. (1997) J Biol Chem 272, 27678-85.
  10. Souchelnytskyi, S. et al. (1997) J Biol Chem 272, 28107-15.
  11. Liu, X. et al. (1997) Proc Natl Acad Sci U S A 94, 10669-74.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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Revision 3
#3102

SMAD2/3 Antibody

Western Blotting Image 1: SMAD2/3 Antibody Expand Image
Western blot analysis of various cell lines using SMAD2/3 Antibody #3102.
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