Revision 3
Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

40-50

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P21453

Entrez-Gene Id:

1901

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:1600 - 1:3200

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Sphingosine-1-Phosphate Receptor 1 (E8U3O) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total sphingosine-1-phosphate receptor 1 protein. Nonspecific nuclear background may be observed by immunofluorescence in some cell lines, especially with higher than recommended concentrations of antibody.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Gly366 of human sphingosine-1-phosphate receptor 1 protein.

Background

Sphingosine-1-phosphate receptor 1 (S1PR1, EDG1) is a G protein-coupled receptor (GPCR), one of five members (S1PR1-5) belonging to the sphingosine-1-phosphate receptor (S1PR) family (1,2). This family of GPCRs has been shown to exhibit broad and often overlapping expression patterns across a wide array of tissues. The cognate ligand for S1PRs is sphingosine-1-phosphate (S1P), a phosphorylated lipid signaling molecule derived from sphingosine. S1P/S1PR binding can trigger the activation and/or inhibition of various downstream signaling pathways, depending on context. Pathways identified downstream of S1P/S1PR include PI3K/Akt, PLC, Ras/MAPK and PKA (3,4). S1P/S1PR1 signaling pathways play important roles in many basic cellular functions during normal development, including chemotaxis, vascular integrity, and immune cell egress, but can also contribute to a variety of pathological conditions, including atherogenesis, multiple sclerosis, and tumorigenesis (5-9).

  1. Pérez-Jeldres, T. et al. (2021) Drugs 81, 985-1002.
  2. Chun, J. et al. (2021) Drugs 81, 207-231.
  3. Pan, Y. et al. (2021) Clin Exp Pharmacol Physiol 48, 637-650.
  4. Xiao, L. et al. (2019) Front Immunol 10, 1409.
  5. Rivera, J. et al. (2008) Nat Rev Immunol 8, 753-63.
  6. Anwar, M. and Mehta, D. (2020) Biochim Biophys Acta Mol Cell Biol Lipids 1865, 158760.
  7. Song, J.H. et al. (2021) Biomol Ther (Seoul) 29, 373-383.
  8. Roy, R. et al. (2021) CNS Drugs 35, 385-402.
  9. Anu, B. et al. (2021) Adv Protein Chem Struct Biol 125, 259-274.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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Revision 3
#63335

Sphingosine-1-Phosphate Receptor 1 (E8U3O) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: Sphingosine-1-Phosphate Receptor 1 (E8U3O) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from SK-HEP-1 and DU 145 cells using Sphingosine-1-Phosphate Receptor 1 (E8U3O) Rabbit mAb (upper) and GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower). The absence of sphingosine-1-phosphate receptor 1 protein in DU 145 cells is consistent with mRNA expression profiles reported in public bioinformatic databases, confirming specificity of the antibody for sphingosine-1-phosphate receptor 1.
Western Blotting Image 2: Sphingosine-1-Phosphate Receptor 1 (E8U3O) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell lines and tissues using Sphingosine-1-Phosphate Receptor 1 (E8U3O) Rabbit mAb (upper) and GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 (lower). The absence of sphingosine-1-phosphate receptor 1 protein in DU 145 cells is consistent with mRNA expression profiles reported in public bioinformatic databases, confirming specificity of the antibody for sphingosine-1-phosphate receptor 1.
Immunoprecipitation Image 1: Sphingosine-1-Phosphate Receptor 1 (E8U3O) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of sphingosine-1-phosphate receptor 1 protein from Sup-M2 cell extracts. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, and lane 3 is Sphingosine-1-Phosphate Receptor 1 (E8U3O) Rabbit mAb. Western blot analysis was performed using Sphingosine-1-Phosphate Receptor 1 (E8U3O) Rabbit mAb. Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 was used as a secondary antibody.
Immunofluorescence Image 1: Sphingosine-1-Phosphate Receptor 1 (E8U3O) Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of SK-HEP-1 cells (left, positive), OVCAR-8 cells (middle, positive), and DU 145 cells (right, negative) using Sphingosine-1-Phosphate Receptor 1 (E8U3O) Rabbit mAb (green), COX IV (4D11-B3-E8) Mouse mAb #11967 (red), and ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961 (blue).