Revision 1

#2191Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IHC-P, ChIP

REACTIVITY:

H M R Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

180

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#Q15788

Entrez-Gene Id:

8648

Product Information

Product Usage Information

For optimal ChIP results, use 5 μl of antibody and 10 μg of chromatin (approximately 4 x 106 cells) per IP. This antibody has been validated using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kits.

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:100
Immunohistochemistry (Paraffin) 1:200
Chromatin IP 1:100

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

SRC-1 (128E7) Rabbit mAb detects endogenous levels of total SRC-1 protein (all three isoforms). The antibody does not cross-react with other SRC proteins, including SRC-2 and SRC-3.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat, Monkey

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to the sequence of human SRC-1 protein.

Background

There are three members of the steroid receptor co-activator (SRC) family of proteins: SRC-1 (NCoA-1), SRC-2 (TIF2/GRIP1/NCoA-2), and SRC-3 (ACTR/pCIP/RAC3/TRAM-1/AIB1). All SRC family members share significant structural homology and function to stimulate transcription mediated by nuclear hormone receptors and other transcriptional activators such as Stat3, NF-κB, E2F1, and p53 (1-4). Two SRC proteins, SRC-1 and SRC-3, function as histone acetyltransferases (5,6). In addition, all three family members can recruit other histone acetyltransferases (CBP/p300, PCAF) and histone methyltransferases (PRMT1, CARM1) to target promoters and cooperate to enhance expression of many genes (5-8). The SRC proteins play important roles in multiple physiological processes including cell proliferation, cell survival, somatic cell growth, mammary gland development, female reproductive function, and vasoprotection (9). SRC-1 and SRC-3 are conduits for kinase-mediated growth factor signaling to the estrogen receptor and other transcriptional activators. Seven SRC-1 phosphorylation sites and six SRC-3 phosphorylation sites have been identified, which are induced by steroids, cytokines, and growth factors and involve multiple kinase signaling pathways (9-11). Research has shown that all three SRC family members are associated with increased activity of nuclear receptors in breast, prostate, and ovarian carcinomas. According to the literature, SRC-3 is frequently amplified or overexpressed in a number of cancers (12), and SRC-1/PAX3 and SRC-2/MYST3 translocations are found associated with rhabdomyosarcoma and acute myeloid leukemia, respectively (13,14).

  1. Giraud, S. et al. (2002) J. Biol. Chem. 277, 8004-8011.
  2. Na, S.Y. et al. (1998) J. Biol. Chem. 273, 10831-10834.
  3. Louie, M.C. et al. (2004) Mol. Cell Biol. 24, 5157-5171.
  4. Lee, S.K. et al. (1999) Mol. Endocrinol. 13, 1924-1933.
  5. Spencer, T.E. et al. (1997) Nature 389, 194-198.
  6. Chen, H. et al. (1997) Cell 90, 569-580.
  7. Koh, S.S. et al. (2001) J. Biol. Chem. 276, 1089-1098.
  8. Chen, D. et al. (1999) Science 284, 2174-2177.
  9. Wu, R.C. et al. (2004) Mol. Cell 15, 937-949.
  10. Rowan, B.G. et al. (2000) J. Biol. Chem. 275, 4475-4483.
  11. Zhou, H.J. et al. (2005) Cancer Res. 65, 7976-7983.
  12. Torres-Arzayus, M.I. et al. (2004) Cancer Cell 6, 263-274.
  13. Wachtel, M. et al. (2004) Cancer Res. 64, 5539-5545.
  14. Deguchi, K. et al. (2003) Cancer Cell 3, 259-271.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IHC-P: Immunohistochemistry (Paraffin) ChIP: Chromatin IP

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#2191

SRC-1 (128E7) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: SRC-1 (128E7) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of cell extracts from various cell types using SRC-1 (128E7) Rabbit mAb.
No image available
Immunohistochemistry Image 1: SRC-1 (128E7) Rabbit mAb Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human breast carcinoma using SRC-1 (128E7) Rabbit mAb.
Chromatin Immunoprecipitation Image 1: SRC-1 (128E7) Rabbit mAb Expand Image
Chromatin immunoprecipitations were performed with cross-linked chromatin from LS180 cells treated with calcitriol (10nM, 3 hours) and either SRC-1 (128E7) Rabbit mAb or Normal Rabbit IgG #2729 using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003. The enriched DNA was quantified by real-time PCR using SimpleChIP® Human c-Fos Upstream Primers #25661 and SimpleChIP® Human Nanog Promoter Primers #95064. The amount of immunoprecipitated DNA in each sample is represented as signal relative to the total amount of input chromatin, which is equivalent to one.