Revision 3

#71128Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, C&R

REACTIVITY:

M

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

300

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#Q3URK3

Entrez-Gene Id:

52463

Product Information

Product Usage Information

The CUT&RUN dilution was determined using CUT&RUN Assay Kit #86652.
Application Dilution
Western Blotting 1:1000
CUT&RUN 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/mL BSA, 50% glycerol, and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

TET1 (E2J2D) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total TET1 protein.

Species Reactivity:

Mouse

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues near the carboxy terminus of mouse TET1 protein.

Background

Methylation of DNA at cytosine residues is a heritable, epigenetic modification that is critical for proper regulation of gene expression, genomic imprinting, and mammalian development (1,2). 5-methylcytosine is a repressive epigenetic mark established de novo by two enzymes, DNMT3a and DNMT3b, and is maintained by DNMT1 (3,4). 5-methylcytosine was originally thought to be passively depleted during DNA replication. However, subsequent studies have shown that Ten-Eleven Translocation (TET) proteins TET1, TET2, and TET3 can catalyze the oxidation of methylated cytosine to 5-hydroxymethylcytosine (5-hmC) (5). Additionally, TET proteins can further oxidize 5-hmC to form 5-formylcytosine (5-fC) and 5-carboxylcytosine (5-caC), both of which are excised by thymine-DNA glycosylase (TDG), effectively linking cytosine oxidation to the base excision repair pathway and supporting active cytosine demethylation (6,7). TET1 is highly expressed in embryonic stem cells and is essential for maintaining stem cell pluripotency through demethylation of the Nanog promoter (8). Aberrant TET1 expression has also been implicated in a variety of cancers, including hepatocellular carcinoma, T-cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL), and triple-negative breast cancer (TNBC), among others (9-11).

  1. Hermann, A. et al. (2004) Cell Mol Life Sci 61, 2571-87.
  2. Turek-Plewa, J. and Jagodziński, P.P. (2005) Cell Mol Biol Lett 10, 631-47.
  3. Okano, M. et al. (1999) Cell 99, 247-57.
  4. Li, E. et al. (1992) Cell 69, 915-26.
  5. Tahiliani, M. et al. (2009) Science 324, 930-5.
  6. He, Y.F. et al. (2011) Science 333, 1303-7.
  7. Ito, S. et al. (2011) Science 333, 1300-3.
  8. Ito, S. et al. (2010) Nature 466, 1129-33.
  9. Shirai, K. et al. (2021) Cancer Sci 112, 2855-2869.
  10. Bamezai, S. et al. (2021) Leukemia 35, 389-403.
  11. Good, C.R. et al. (2018) Cancer Res 78, 4126-4137.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v nonfat dry milk, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting C&R: CUT&RUN

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 3
#71128

TET1 (E2J2D) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: TET1 (E2J2D) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from F9 and P19 cells using TET1 (E2J2D) Rabbit mAb.
CUT and RUN Image 1: TET1 (E2J2D) Rabbit mAb Expand Image
CUT&RUN was performed with F9 cells and TET1 (E2J2D) Rabbit mAb using CUT&RUN Assay Kit #86652. DNA library was prepared using DNA Library Prep Kit for Illumina (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795. The figure shows binding across Fam72a, a known target gene of TET1 (see additional figure containing qPCR data).
CUT and RUN Image 2: TET1 (E2J2D) Rabbit mAb Expand Image
CUT&RUN was performed with F9 cells and TET1 (E2J2D) Rabbit mAb using CUT&RUN Assay Kit #86652. DNA library was prepared using DNA Library Prep Kit for Illumina (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795. The figures show binding across chromosome 1 (upper), including Fam72a (lower), a known target gene of TET1 (see additional figure containing qPCR data).
CUT and RUN Image 3: TET1 (E2J2D) Rabbit mAb Expand Image
CUT&RUN was performed with F9 cells and either TET1 (E2J2D) Rabbit mAb or Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362, using CUT&RUN Assay Kit #86652. The enriched DNA was quantified by real-time PCR using mouse Fam72 promoter primers, mouse Pex16 promoter primers, and SimpleChIP® Mouse RPL30 Intron 2 Primers #7015. The amount of immunoprecipitated DNA in each sample is represented as signal relative to the total amount of input chromatin, which is equivalent to one.