Revision 1

#8728Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP

REACTIVITY:

H Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

130

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#P40818

Entrez-Gene Id:

9101

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

USP8 Antibody recognizes endogenous levels of total USP8 protein.

Species Reactivity:

Human, Monkey

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Pro320 of human USP8 protein. Antibodies are purified by protein A and peptide affinity chromatography.

Background

Ubiquitinating enzymes (UBEs) catalyze protein ubiquitination, a reversible process countered by deubiquitinating enzyme (DUB) action (1,2). Five DUB subfamilies are recognized, including the USP, UCH, OTU, MJD, and JAMM enzymes. The deubiquitinating enzyme ubiquitin-specific protease 8 (USP8/UBPy) is a cysteine protease belonging to the USP/UBP subfamily. Research studies have shown that USP8 is an essential growth-regulated enzyme indespensible for cell proliferation and survival (3,4). Indeed, conditional knock-out of murine USP8 was shown to promote a dramatic loss in expression of receptor tyrosine kinases, including EGFR, ErbB3, and c-Met (4). In agreement with these findings, USP8 inactivation leads to enhanced ubiquitination of ligand-activated EGFR (5,6). Furthermore, phosphorylation of USP8 at Ser680 results in its binding of 14-3-3, catalytic inactivation, and reduced EGFR deubiquitination (7). It appears as though USP8, in conjunction with components of the ESCRT-0 complex, plays an integral role in the early endosomal sorting machinery that functions to protect EGFR from lysosomal degradation (8,9).

  1. Nijman, S.M. et al. (2005) Cell 123, 773-86.
  2. Nalepa, G. et al. (2006) Nat Rev Drug Discov 5, 596-613.
  3. Naviglio, S. et al. (1998) EMBO J 17, 3241-50.
  4. Niendorf, S. et al. (2007) Mol Cell Biol 27, 5029-39.
  5. Alwan, H.A. and van Leeuwen, J.E. (2007) J Biol Chem 282, 1658-69.
  6. Mizuno, E. et al. (2005) Mol Biol Cell 16, 5163-74.
  7. Mizuno, E. et al. (2007) Exp Cell Res 313, 3624-34.
  8. Row, P.E. et al. (2006) J Biol Chem 281, 12618-24.
  9. Berlin, I. et al. (2010) J Biol Chem 285, 34909-21.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#8728

USP8 Antibody

Western Blotting Image 1: USP8 Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell lines using USP8 Antibody.
Western Blotting Image 2: USP8 Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from 293T cells, either mock transfected (-) or transfected (+) with a Myc/DDK-tagged cDNA expression construct encoding full-length human USP8, using USP8 Antibody.
No image available