Revision 3
Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
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UniProt ID:

#O88643

Entrez-Gene Id:

18479

Product Information

Product Usage Information

CST recommends transfection with 100 nM SignalSilence® PAK1 siRNA I (Mouse Specific) 48 to 72 hours prior to cell lysis. For transfection procedure, follow protocol provided by the transfection reagent manufacturer. Please feel free to contact CST with any questions on use.

Each vial contains the equivalent of 100 transfections, which corresponds to a final siRNA concentration of 100 nM per transfection in a 24-well plate with a total volume of 300 μl per well.

Storage

SignalSilence® siRNA is supplied in RNAse-free water. Aliquot and store at -20ºC.

Specificity / Sensitivity

Species Reactivity:

Mouse

Product Description

SignalSilence® PAK1 siRNA I (Mouse Specific) from Cell Signaling Technology (CST) allows the researcher to specifically inhibit PAK1 expression using RNA interference, a method whereby gene expression can be selectively silenced through the delivery of double stranded RNA molecules into the cell. All SignalSilence® siRNA products from CST are rigorously tested in-house and have been shown to reduce target protein expression by western analysis.

Background

The p21-activated kinase (PAK) family of serine/threonine kinases is engaged in multiple cellular processes, including cytoskeletal reorganization, MAPK signaling, apoptotic signaling, control of phagocyte NADPH oxidase, and growth factor-induced neurite outgrowth (1,2). Several mechanisms that induce PAK activity have been reported. Binding of Rac/Cdc42 to the CRIB (or PBD) domain near the amino terminus of PAK causes autophosphorylation and conformational changes in PAK (1). Phosphorylation of PAK1 at Thr423 by PDK induces activation of PAK1 (3). Several autophosphorylation sites have been identified, including Ser199 and Ser204 of PAK1, and Ser192 and Ser197 of PAK2 (4,5). Because the autophosphorylation sites are located in the amino-terminal inhibitory domain, it has been hypothesized that modification in this region prevents the kinase from reverting to an inactive conformation (6). Research indicates that phosphorylation at Ser144 of PAK1 or Ser139 of PAK3 (located in the kinase inhibitory domain) affects kinase activity (7). Phosphorylation at Ser21 of PAK1 or Ser20 of PAK2 regulates binding with the adaptor protein Nck (8). PAK4, PAK5/7, and PAK6 have lower sequence similarity with PAK1-3 in the amino-terminal regulatory region (9). Phosphorylation at Ser474 of PAK4, a site analogous to Thr423 of PAK1, may play a pivotal role in regulating the activity and function of PAK4 (10). PAK family members are widely expressed, and often overexpressed in human cancer (11,12).

  1. Knaus, U.G. and Bokoch, G.M. (1998) Int. J. Biochem. Cell Biol. 30, 857-62.
  2. Daniels, R.H. et al. (1998) EMBO J. 17, 754-64.
  3. King, C.C. et al. (2000) J. Biol. Chem. 275, 41201-9.
  4. Manser, E. et al. (1997) Mol. Cell. Biol. 17, 1129-43.
  5. Gatti, A. et al. (1999) J. Biol. Chem. 274, 8022-8.
  6. Lei, M. et al. (2000) Cell 102, 387-97.
  7. Chong, C. et al. (2001) J. Biol. Chem. 276, 17347-53.
  8. Zhao, Z. et al. (2000) Mol. Cell. Biol. 20, 3906-17.
  9. Abo, A. et al. (1998) EMBO J. 17, 6527-40.
  10. Qu, J. et al. (2001) Mol. Cell. Biol. 21, 3523-33.
  11. Wen, Y.Y. et al. (2014) Expert Opin Ther Targets 18, 807-15.
  12. Molli, P.R. et al. (2009) Oncogene 28, 2545-55.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
SignalSilence is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 3
#8093

SignalSilence® PAK1 siRNA I (Mouse Specific)

SignalSilence® PAK1 siRNA I (Mouse Specific): Image 1 Expand Image
Western blot analysis of extracts from NIH/3T3 cells, transfected with 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-) or SignalSilence® PAK1 siRNA I (Mouse Specific) (+), using PAK1 Antibody #2602 (upper) or α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125 (lower). The PAK1 Antibody confirms silencing of PAK1 expression, while the α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb is used as a loading control.