Revision 1

#13553Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
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UniProt ID:

#O95405

Entrez-Gene Id:

9372

Product Information

Product Usage Information

CST recommends transfection with 100 nM SignalSilence® Sara siRNA II 48 to 72 hours prior to cell lysis. For transfection procedure, follow the protocol provided by the transfection reagent manufacturer. Please feel free to contact CST with any questions on use.

Each vial contains the equivalent of 100 transfections, which corresponds to a final siRNA concentration of 100 nM per transfection in a 24-well plate with a total volume of 300 μl per well.

Storage

SignalSilence® siRNA is supplied in RNAse-free water. Aliquot and store at -20ºC.

Specificity / Sensitivity

Species Reactivity:

Human

Product Description

SignalSilence® Sara siRNA II from Cell Signaling Technology (CST) allows the researcher to specifically inhibit Sara expression using RNA interference, a method whereby gene expression can be selectively silenced through the delivery of double stranded RNA molecules into the cell. All SignalSilence® siRNA products from CST are rigorously tested in-house and have been shown to reduce target protein expression by western analysis.

Background

The Smad anchor for receptor activation (SARA, ZFYVE9) protein is an FYVE domain-containing protein originally identified as a regulator of TGF-β signaling (1). FYVE domains are zinc finger-like domains that bind to phosphatidylinositol 3-phosphate and are responsible for endosomal trafficking (2). While the role of Sara in TGF-β signaling has been questioned (3,4), early research studies demonstrate that Sara enhances TGF-β signaling by binding and recruiting non-activated Smad2 and Smad3 to the TGF-β receptor complex (1). Upon Smad2 activation, Sara dissociates from the complex while phosphorylated Smad2/3 translocates to the nucleus to bind to the common Smad, Smad4. Sara can also function as an anchor for the protein phosphatase 1 (PP1c) catalytic subunit, which is involved in the Smad7-mediated dephosphorylation of TGF-β type I receptor (5,6). Additional research studies show that expression of Sara plays a critical role in maintenance of the epithelial cell phenotype and that expression is regulated during the epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) and fibrosis (7,8).

  1. Tsukazaki, T. et al. (1998) Cell 95, 779-91.
  2. Itoh, F. et al. (2002) Genes Cells 7, 321-31.
  3. Bakkebø, M. et al. (2012) FEBS Lett 586, 3367-72.
  4. Goto, D. et al. (2001) Biochem Biophys Res Commun 281, 1100-5.
  5. Bennett, D. and Alphey, L. (2002) Nat Genet 31, 419-23.
  6. Shi, W. et al. (2004) J Cell Biol 164, 291-300.
  7. Runyan, C.E. et al. (2009) J Biol Chem 284, 25181-9.
  8. Zhao, B.M. and Hoffmann, F.M. (2006) Mol Biol Cell 17, 3819-31.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
CST is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
SignalSilence is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

使用に関する制限

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Revision 1
#13553

SignalSilence® Sara siRNA II

SignalSilence® Sara siRNA II: Image 1 Expand Image
Western blot analysis of extracts from SH-SY-5Y cells, transfected with 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-), SignalSilence® Sara siRNA I #13542 (+) or SignalSilence® Sara siRNA II (+), using Sara (D5X4F) Rabbit mAb #13285 (upper) or α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487 (lower). The Sara (D5X4F) Rabbit mAb confirms silencing of Sara expression, while the α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb is used as a loading control.