免疫組織化学染色 (Leica^® BOND™)

注意：適切な抗体希釈率は、製品データシートまたはウェブページをご覧ください。

	手順	試薬	時間/温度
1	ワックスの除去	BOND™ Dewax Solution、100% Alcohol、BOND™ Wash Solution	Leica® BOND™プログラム前
2	抗原賦活化	BOND™ Epitope Retrieval ER2 Solution	20分、100˚C | プロトコール：ER2でHIER 20分
3	ペルオキシドのブロッキング	Refine Detection Kit Peroxide Block*	5 分
	洗浄	BOND™ Wash Solution	3x分
4	タンパク質ブロッキング (オプション)	NGS #5425またはAnimal-Free Blocking Solution #15019	20 分
5	一次抗体^	SignalStain® Antibody Diluent #8112で希釈	30 分
	洗浄	BOND™ Wash Solution	3x 2:00 分
NA	Post Primary Mouse Linker	Refine Detection Kit Post Primary*	適用なし
6	二次検出	Refine Detection Kit Polymer*	10 分
	洗浄	BOND™ Wash Solution/Deionized Water	カスタム (下記参照)
7a	可視化	Refine Detection Kit Mixed DAB Refine*	X​ 分
7b	可視化	Refine Detection Kit Mixed DAB Refine*	10 分
	洗浄	Deionized Water	3x分
8	対比染色	Refine Detection Kit Hematoxylin*	5 分
	洗浄	Deionized Water	X​ 分
	洗浄	BOND™ Wash Solution	X​ 分
	洗浄	Deionized Water	X​ 分
9	脱水 (発色後処理)
	95%エタノールで切片を各10秒間ずつ、2回インキュベートしてください。
	100%エタノールで切片を各10秒間ずつ、2回インキュベートしてください。
	キシレンで切片を各10秒間ずつ、2回インキュベートしてください。
10	切片をSignalStain® Mounting Medium #84583とカバースリップで封入してください。
	(オプション) カスタム洗浄：	BOND™ Wash Solution	2:00分
		BOND™ Wash Solution	ディスペンサータイプ：オープン 0:00分
		BOND™ Wash Solution	2:00分
		BOND™ Wash Solution	ディスペンサータイプ：オープン 0:00分
		BOND™ Wash Solution	0:00
		Deionized Water	0:00

*試薬は BOND™ Polymer Refine Detection キット (カタログ番号：DS9800) に含まれています。

LEICA^® is a registered trademark of Leica Microsystems IR GmbH.

BOND™ is a trademark of Leica Biosystems Melbourne Pty. CSTとLeica Microsystems IR GmbH、Leica Biosystems Melbourne Pty. Ltd. の間に業務提携やスポンサー関係はありません。