Revision 4
Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

FC-FP

REACTIVITY:

H M

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P43403, #P43405

Entrez-Gene Id:

7535, 6850

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:50

Storage

Supplied in PBS (pH 7.2), less than 0.1% sodium azide and 2 mg/ml BSA. Store at 4°C. Do not aliquot the antibodies. Protect from light. Do not freeze.

Specificity / Sensitivity

Phospho-Zap-70 (Tyr319)/Syk (Tyr352) (65E4) Rabbit mAb (PE Conjugate) detects endogenous levels of Zap-70 only when phosphorylated at Tyr319. It cross-reacts with endogenous levels of Syk when phosphorylated at Tyr352.

Species Reactivity:

Human, Mouse

Species predicted to react based on 100% sequence homology

Rat, Hamster, Chicken, Bovine, Dog, Pig, Horse

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic phosphopeptide corresponding to residues surrounding Tyr319 of human Zap-70 protein.

Product Description

This Cell Signaling Technology antibody is conjugated to phycoerythrin (PE) and tested in-house for direct flow cytometry analysis in human cells. The antibody is expected to exhibit the same species cross-reactivity as the unconjugated Phospho-Zap-70 (Tyr319)/Syk (Tyr352) (65E4) Rabbit mAb #2717.

Background

The Syk family protein tyrosine kinase Zap-70 is expressed in T and NK cells and plays a critical role in mediating T cell activation in response to T cell receptor (TCR) engagement (1). Following TCR engagement, Zap-70 is rapidly phosphorylated on several tyrosine residues through autophosphorylation and transphosphorylation by the Src family tyrosine kinase Lck (2-6). Tyrosine phosphorylation correlates with increased Zap-70 kinase activity and downstream signaling events. Expression of Zap-70 is correlated with disease progression and survival in patients with chronic lymphocytic leukemia (7,8).

  1. Chu, D.H. et al. (1998) Immunol Rev 165, 167-80.
  2. Iwashima, M. et al. (1994) Science 263, 1136-9.
  3. Neumeister, E.N. et al. (1995) Mol Cell Biol 15, 3171-8.
  4. Chan, A.C. et al. (1995) EMBO J 14, 2499-508.
  5. Williams, B.L. et al. (1999) EMBO J 18, 1832-44.
  6. Di Bartolo, V. et al. (1999) J Biol Chem 274, 6285-94.
  7. Wiestner, A. et al. (2003) Blood 101, 4944-51.
  8. Crespo, M. et al. (2003) N Engl J Med 348, 1764-75.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Applications Key

FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 4
#14791

Phospho-Zap-70 (Tyr319)/Syk (Tyr352) (65E4) Rabbit mAb (PE Conjugate)

Flow Cytometry Image 1: Phospho-Zap-70 (Tyr319)/Syk (Tyr352) (65E4) Rabbit mAb (PE Conjugate) Expand Image
Flow cytometric analysis of serum-starved Ramos cells, untreated (blue) or treated with IgM + H2O2 (IgM 10 μg/ml,

H2O2 3.3 mM, 30 min; green) using Phospho-Zap-70 (Tyr319)/Syk (Tyr352) (65E4) Rabbit mAb (PE Conjugate) (solid lines) or concentration-matched Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (PE Conjugate) #5742 (dashed lines).