Revision 1
Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
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Product Information

Storage

All components in this kit are stable for at least 12 months when stored at the recommended temperature and left unused. Upon receipt, #11733 and #9808 should be removed from kit box and stored at 4ºC and room temperature, respectively.

Specificity / Sensitivity

Species Reactivity:

Human

Species predicted to react based on 100% sequence homology

All Species Expected

Product Description

The CellSimple Cell Health Assay Kit is a fluorescent assay designed for use with the CellSimple Cell Analyzer. The Cell Health Assay can determine cell viability by measuring intracellular esterase activity and plasma membrane integrity. The assay kit contains the fluorescent dyes Calcein-AM and Propidium Iodide (PI) and is therefore able to stain both live and dead cells simultaneously.

Background

The CellSimple Cell Analyzer is a benchtop instrument that utilizes a disposable thin-film cassette and a combination of a 488 nm laser, two photomultiplier tubes (525/45 nm and 561 nm LP filters), Coulter Principle-based cell measurements, and on-board software to provide easy-to-run applications and data analysis. Data acquisition occurs within approximately 10 seconds per test. The instrument relies on disposable cassettes for sample handling, which alleviates the need for flow cell cleaning and fluidics maintenance and the instrument is small enough to be portable between the lab bench and the hood. Applications include quantitative assessments of cell viability, apoptosis, other labeled antibody markers and single and multiplexed bead-based assays for protein and cellular analysis.
Measures of cell viability and cytotoxicity are broadly used to study the effects of growth factors and cytokines, inhibitors and activators, and immune response signals. Calcein-AM is the acetomethoxyl form of calcein, a highly lipophilic, cell membrane permeable dye. Intracellular esterase activity converts the non-fluorescent Calcein-AM to the highly fluorescent Calcein, which is retained only within live cells (1,2). The DNA-binding agent PI is cell membrane impermeable and only enters dead cells or those with damaged cell membranes. Intracellular PI binds DNA and undergoes an approximate 40-fold enhancement in fluorescence intensity. As a result, live cells will produce a strong green fluorescence resulting from the conversion of Calcein-AM to Calcein, while dead cells produce a strong red fluorescence due to the presence of PI (3,4). These fluorescent signals can be detected using the Cell Health application on the CellSimple Cell Analyzer.

  1. Papadopoulos, N.G. et al. (1994) J Immunol Methods 177, 101-11.
  2. Decherchi, P. et al. (1997) J Neurosci Methods 71, 205-13.
  3. Cárdenas, W. et al. (2004) Fish Shellfish Immunol 17, 223-33.
  4. Hiraoka, Y. and Kimbara, K. (2002) Appl Environ Microbiol 68, 2031-5.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

使用に関する制限

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Revision 1
#83323

CellSimple Cell Health Assay Kit

CellSimple™ Cell Health Assay Kit: Image 1 Expand Image
CellSimple cell-based analysis of Jurkat cells, untreated (left panel) or treated with Staurosporine #9953 (10 μM, 18 hr; right panel) using the CellSimple Cell Health Assay Kit. Data was collected in both red (561 nm LP; y-axis) and green (525/45 nm; x-axis) channels and analyzed on the Cell Health application. Note the shift from high mean fluorescence intensity (MFI) in the green channel (untreated live cells) to high MFI in the red channel (staurosporine-treated, dead cells). Instrument screen shots are shown.
CellSimple™ Cell Health Assay Kit: Image 2 Expand Image
Graphical representation of the live and dead cell populations in untreated (left panel) or Staurosporine treated (10 μM, 18 hr; right panel) Jurkat cells. Analysis was performed using the Cell Health application and is based on the measurements obtained from the four quadrants of the dot blot figure shown on the previous page. Instrument screen shots are shown.