Revision 1

#14770Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP

REACTIVITY:

H M

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

76

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#Q13094

Entrez-Gene Id:

3937

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:100

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Phospho-SLP-76 (Tyr145) Antibody recognizes endogenous levels of SLP-76 protein only when phosphorylated at Tyr145. The antibody may cross-react with phospho-BLNK in B cells.

Species Reactivity:

Human, Mouse

Species predicted to react based on 100% sequence homology

Bovine

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic phosphopeptide corresponding to residues surrounding Tyr145 of human SLP-76 protein. Antibodies are purified by protein A and peptide affinity chromatography.

Background

SH2 domain-containing leukocyte protein of 76 kDa (SLP-76) is a hematopoietic adaptor protein that is important in multiple biochemical signaling pathways and necessary for T cell development and activation (1). ZAP-70 phosphorylates SLP-76 and LAT as a result of TCR ligation. SLP-76 has amino-terminal tyrosine residues followed by a proline-rich domain and a carboxy-terminal SH2 domain. Phosphorylation of Tyr113 and Tyr128 result in recruitment of the GEF Vav and the adaptor protein Nck (2). TCR ligation also leads to phosphorylation of Tyr145, which mediates an association between SLP-76 and Itk, which is accomplished in part via the proline-rich domain of SLP-76 and the SH3 domain of Itk (3). Furthermore, the proline-rich domain of SLP-76 binds to the SH3 domains of Grb2-like adaptor Gads (3,4). In resting cells, SLP-76 is predominantly in the cytosol. Upon TCR ligation, SLP-76 translocates to the plasma membrane and promotes the assembly of a multi-protein signaling complex that includes Vav, Nck, Itk, and PLCγ1 (1). The expression of SLP-76 is tightly regulated; the protein is detected at very early stages of thymocyte development, increases as thymocyte maturation progresses, and is reduced as cells mature to CD4+ CD8+ double-positive thymocytes (5).

  1. Clements, J.L. (2003) Immunol Rev 191, 211-9.
  2. Bubeck Wardenburg, J. et al. (1998) Immunity 9, 607-16.
  3. Bunnell, S.C. et al. (2000) J Biol Chem 275, 2219-30.
  4. Liu, S.K. et al. (1999) Curr Biol 9, 67-75.
  5. Clements, J.L. et al. (1998) J Immunol 161, 3880-9.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#14770

Phospho-SLP-76 (Tyr145) Antibody

Western Blotting Image 1: Phospho-SLP-76 (Tyr145) Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from Jurkat cells, untreated (-) or H2O2-treated (11 mM, 1 min; +), using Phospho-SLP-76 (Tyr145) Antibody (upper) and SLP-76 Antibody #4958 (lower).
Immunoprecipitation Image 1: Phospho-SLP-76 (Tyr145) Antibody Expand Image
Immunoprecipitation of phospho-SLP-76 (Tyr145) from Jurkat cell extracts treated with H2O2 (11 mM, 1 min) using Normal Rabbit IgG #2729 (lane 2) or Phospho-SLP-76 (Tyr145) Antibody (lane 3). Lane 1 is 10% input. Western blot analysis was performed using Phospho-SLP-76 (Tyr145) Antibody.