Revision 6

#5318Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IHC-P, IF-F, IF-IC

REACTIVITY:

H M R Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

67

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#O95831

Entrez-Gene Id:

9131

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:100
Immunohistochemistry (Paraffin) 1:50 - 1:200
Immunofluorescence (Frozen) 1:400
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:400

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

For a carrier free (BSA and azide free) version of this product see product #62147.

Specificity / Sensitivity

AIF (D39D2) XP® Rabbit mAb detects endogenous levels of total AIF protein.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat, Monkey

Species predicted to react based on 100% sequence homology

Bovine, Dog

Source / Purification

Monoclonal antibody was produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Ala520 of human AIF protein.

Background

Apoptosis-inducing factor (AIF, PDCD8) is a ubiquitously expressed flavoprotein that plays a critical role in caspase-independent apoptosis (reviewed in 1,2). AIF is normally localized to the mitochondrial intermembrane space and released in response to apoptotic stimuli (3). Treatment of isolated nuclei with recombinant AIF leads to early apoptotic events, such as chromatin condensation and large-scale DNA fragmentation (3). Studies of AIF knockout mice have shown that the apoptotic activity of AIF is cell type and stimuli-dependent. Also noted was that AIF was required for embryoid body cavitation, representing the first wave of programmed cell death during embryonic morphogenesis (4). Structural analysis of AIF revealed two important regions, the first having oxidoreductase activity and the second being a potential DNA binding domain (3,5). While AIF is redox-active and can behave as an NADH oxidase, this activity is not required for inducing apoptosis (6). Instead, recent studies suggest that AIF has dual functions, a pro-apoptotic activity in the nucleus via its DNA binding and an anti-apoptotic activity via the scavenging of free radicals through its oxidoreductase activity (2,7).

  1. Daugas, E. et al. (2000) FEBS Lett 476, 118-23.
  2. Lipton, S.A. and Bossy-Wetzel, E. (2002) Cell 111, 147-50.
  3. Susin, S.A. et al. (1999) Nature 397, 441-6.
  4. Joza, N. et al. (2001) Nature 410, 549-54.
  5. Ye, H. et al. (2002) Nat Struct Biol 9, 680-4.
  6. Miramar, M.D. et al. (2001) J Biol Chem 276, 16391-8.
  7. Klein, J.A. et al. (2002) Nature 419, 367-74.
  8. Kozako, T. et al. (2015) Sci Rep 5, 11345.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IHC-P: Immunohistochemistry (Paraffin) IF-F: Immunofluorescence (Frozen) IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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