Revision 2

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Cell Signaling Technology

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

FC-FP

REACTIVITY:

M

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

Source/Isotype:

Rat IgG2b

UniProt ID:

#P08101-2, #P08508

Entrez-Gene Id:

14130, 14131

Product Information

Product Usage Information

We recommend using 0.25-1.0 μg of antibody per test. The optimal dilution is assay dependent and may require titration.

Application Dilution
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:50 - 1:200

Storage

Supplied in 10 mM NaH2PO4, 150 mM NaCl, 0.09% NaN3, pH7.2. This product is stable for 12 months when stored at 4ºC. Do not aliquot the antibody. Do not freeze.

Specificity / Sensitivity

CD16/CD32 (2.4G2) Rat mAb recognizes endogenous levels of total CD16/CD32 protein. This antibody detects an epitope within the extracellular domain and is expected to detect all isoforms of CD16 and CD32.

Species Reactivity:

Mouse

Source / Purification

This monoclonal antibody was purified from tissue culture supernatant via affinity chromatography.

Background

CD64 (FcgammaRI), CD32 (FcgammaRII), and CD16 (FcgammaRIII) are three classes of the immunoglobulin superfamily. CD64 has a high affinity for IgG with three Ig-like domains while CD32 and CD16 have low affinities with two Ig-like domains. Two genes encode CD16-A and CD16-B resulting only in a 6 amino acid difference in their ectodomains. However, CD16-A has a transmembrane anchor versus CD16-B, which has a glycosylphosphatidylinositol (1). CD64, CD32, and CD16 are membrane glycoproteins that are expressed by all immunologically active cells and trigger various immune functions (activate B cells, phagocytosis, antibody-dependent cellular cytotoxicity, immune complex clearance, and enhancement of antigen presentation) (2). CD16 cross-linking induces tyrosine phosphorylation (Tyr394) of Lck in NK cells (3). CD32 has tyrosine-based activation motifs in the cytoplasmic domain in contrast to CD16, which associates with molecules possessing these motifs (1).
The 2.4G2 clone is widely used as a pre-treatment reagent to reduce non-specific binding of mouse Fc-receptors (4).

  1. Maenaka, K. et al. (2001) J. Biol. Chem. 276, 44898-44904.
  2. Fridman, W. H. et al. (1992) Immunol. Rev. 125, 49-76.
  3. Pignata, C. et al. (1993) J. Immunol. 151, 6794-6800.
  4. Kurlander, R.J. et al. (1984) J Immunol 133, 855-62.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Applications Key

FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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Revision 2
#88280

CD16/CD32 (2.4G2) Rat mAb