Revision 1

#4533Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IF-IC

REACTIVITY:

H M R

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

110

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#Q9UER7

Entrez-Gene Id:

1616

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:25

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Daxx (25C12) Rabbit mAb detects endogenous levels of total Daxx protein. While Daxx has a calculated MW of 81 kDa, it has been shown to run at an apparent MW of 110 kDa at least in part due to post-translational hyper-phosphorylation (5).

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat

Species predicted to react based on 100% sequence homology

Monkey, Bovine, Dog

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to a region surrounding Gln255 of Daxx.

Background

Daxx is a ubiquitously expressed protein that was originally identified through a yeast two-hybrid screen as an interactor with the cytoplasmic domain of Fas. It was found to enhance Fas-mediated apoptosis and activate the JNK pathway (1). However, additional studies have revealed that Daxx is actually a nuclear protein localizing to promyelocytic leukemia oncogenic domains (PODs) (2,3). Nuclear interactions have since been observed with CENP-C (4), Pax3 (5), DNA methyltransferase I (6) and chromatin-associated proteins, including histone deacetylase II, H2A, H2B, H3, H4 and Dek (5). Roles for Daxx have been suggested in transcriptional repression and cell cycle control. Loss of Daxx in mice leads to embryonic lethality with extensive developmental apoptosis, suggesting a role for Daxx directly or indirectly in suppressing cell death (5). Furthermore, inhibition of Daxx expression using RNAi has confirmed Daxx to be anti-apoptotic and to repress transcriptional activity of targets including NF-κB and E2F-1 (7).

  1. Yang, X. et al. (1997) Cell 89, 1067-76.
  2. Torii, S. et al. (1999) EMBO J 18, 6037-49.
  3. Li, H. et al. (2000) Mol Cell Biol 20, 1784-96.
  4. Pluta, A.F. et al. (1998) J Cell Sci 111 ( Pt 14), 2029-41.
  5. Hollenbach, A.D. et al. (1999) EMBO J 18, 3702-11.
  6. Michaelson, J.S. et al. (1999) Genes Dev 13, 1918-23.
  7. Michaelson, J.S. and Leder, P. (2003) J Cell Sci 116, 345-52.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
Alexa Fluor is a registered trademark of Life Technologies Corporation.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#4533

Daxx (25C12) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: Daxx (25C12) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from K562 (human), A20 (mouse) and PC12 (rat) cell lines using Daxx (25C12) Rabbit mAb.
Immunofluorescence Image 1: Daxx (25C12) Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of HeLa cells using Daxx (25C12) Rabbit mAb (green). Actin filaments have been labeled with Alexa Fluor® 555 phalloidin (red).