Revision 1

#2332Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IF-IC

REACTIVITY:

H M R Mk Dm

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

95

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#P13639

Entrez-Gene Id:

1938

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

eEF2 Antibody detects endogenous levels of total eEF2 independent of phosphorylation.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat, Monkey, D. melanogaster

Species predicted to react based on 100% sequence homology

Hamster, Chicken

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues at the amino-terminus of human eEF2. Antibodies are purified by protein A and peptide affinity chromatography.

Background

Eukaryotic elongation factor 2 (eEF2) catalyzes the translocation of peptidyl-tRNA from the A site to the P site on the ribosome. It has been shown that phosphorylation of eEF2 at threonine 56 by eEF2 kinase inhibits its activity (1-4). eEF2 kinase is normally dependent on Ca2+ ions and calmodulin (5,6). eEF2 kinase can also be activated by PKA in response to elevated cAMP levels (7-9), which are generally increased in stress- or starvation-related conditions. A variety of treatments known to raise intracellular Ca2+ or cAMP levels have been shown to result in increased phosphorylation of eEF2, and thus to inhibit peptide-chain elongation. The inactive phosphorylated eEF2 can be converted to its active nonphosphorylated form by a protein phosphatase, most likely a form of protein phosphatase-2A (PP-2A). Insulin, which activates protein synthesis in a wide range of cell types, induces rapid dephosphorylation of eEF2 through mTOR signaling and may involve modulation of the activity of the PP-2A or the eEF2 kinase or both (10).

  1. Nairn, A.C. and Palfrey, H.C. (1987) J. Biol. Chem. 262, 17299-17303.
  2. Ryazanov, A.G. et al. (1988) Nature 334, 170-173.
  3. Carlberg, U. et al. (1990) Eur. J. Biochem. 191, 639-645.
  4. Redpath, N.T. et al. (1993) Eur. J. Biochem. 213, 689-699.
  5. Nairn, A.C. et al. (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82, 7939-7943.
  6. Palfrey, H.C. et al. (1987) J. Biol. Chem. 262, 9785-9792.
  7. Redpath, N.T. and Proud, C.G. (1993) Biochem. J. 293, 31-34.
  8. Diggle, T. et al. (1998) Biochem. J. 336, 525-529.
  9. Hovland, R. et al. (1999) FEBS Lett. 444, 97-101.
  10. Proud, C. (2000) Translational Control of Gene Expression. Cold Spring Harbor Laboratory Press, NY, 719-739.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#2332

eEF2 Antibody

Western Blotting Image 1: eEF2 Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from C6 cells, untreated or forskolin-treated (10 µM for 60 minutes), using Phospho-eEF2 (Thr56) Antibody (upper) or eEF2 Antibody #2332 (lower).
Immunofluorescence Image 1: eEF2 Antibody Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of HeLa cells using eEF2 Antibody (green). Actin filaments have been labeled with DY-554 phalloidin (red). Blue pseudocolor = DRAQ5® #4084 (fluorescent DNA dye).