Revision 1

#15087Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC

REACTIVITY:

H M Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

100

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#O14964

Entrez-Gene Id:

9146

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:100
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:400

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

HRS (D7T5N) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total HRS protein.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Monkey

Species predicted to react based on 100% sequence homology

Bovine, Dog

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues near the carboxy terminus of human HRS protein.

Background

Hepatocyte growth factor-regulated tyrosine kinase substrate (HRS) is a ubiquitously expressed, multidomain-containing protein that is tyrosine phosphorylated upon activation of multiple receptor tyrosine kinases (1). HRS contains a proline-rich region, which may mediate interactions with SH3 domain-containing proteins (1). Research studies have also demonstrated that HRS possesses a phosphatidylinositol 3-phosphate-binding FYVE-type zinc finger domain and a coiled-coil domain that target it to membranes of the endosomal compartment (2-4). HRS also possesses a ubiquitin-interacting motif (UIM) that binds ubiquitinated membrane proteins and, in conjunction with Eps15 and STAM proteins of the ESCRT-0 complex, facilitates their sorting through the endosomal compartment for eventual degradation in the lysosome (5-8). Research studies demonstrate that phosphorylation and ubiquitination of HRS play a role in EGFR intracellular trafficking and degradation (9,10).

  1. Komada, M. and Kitamura, N. (1995) Mol Cell Biol 15, 6213-21.
  2. He, J. et al. (2009) Proteins 76, 852-60.
  3. Raiborg, C. et al. (2001) J Cell Sci 114, 2255-63.
  4. Komada, M. et al. (1997) J Biol Chem 272, 20538-44.
  5. Raiborg, C. et al. (2002) Nat Cell Biol 4, 394-8.
  6. Hirano, S. et al. (2006) Nat Struct Mol Biol 13, 272-7.
  7. Bache, K.G. et al. (2003) J Biol Chem 278, 12513-21.
  8. Urbé, S. et al. (2003) J Cell Sci 116, 4169-79.
  9. Stern, K.A. et al. (2007) Mol Cell Biol 27, 888-98.
  10. Tan, X. et al. (2015) EMBO J 34, 475-90.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v nonfat dry milk, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#15087

HRS (D7T5N) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: HRS (D7T5N) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell lines using HRS (D7T5N) Rabbit mAb.
Immunoprecipitation Image 1: HRS (D7T5N) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of HRS from 293T cell extracts using Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (lane 2) or HRS (D7T5N) Rabbit mAb (lane 3). Lane 1 is 10% input. Western blot analysis was performed using HRS (D7T5N) Rabbit mAb.
Immunofluorescence Image 1: HRS (D7T5N) Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of HeLa cells, untreated (left), treated with wortmannin #9951 (100 nM for 30 min, center) or treated with Human Epidermal Growth Factor (hEGF) #8916 (100 ng/ml for 10 min, right) using HRS (D7T5N) Rabbit mAb (green). Blue pseudocolor = DRAQ5® #4084 (fluorescent DNA dye).