Revision 4

#2972Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, W-S, IP

REACTIVITY:

H M R Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

289

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#P42345

Entrez-Gene Id:

2475

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Simple Western™ 1:10 - 1:50
Immunoprecipitation 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

mTOR Antibody detects endogenous levels of total mTOR. It cross-reacts weakly with some other proteins based on Western analysis.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat, Monkey

Species predicted to react based on 100% sequence homology

Pig, Horse

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Ser2481 of human mTOR. Antibodies are purified by protein A and peptide affinity chromatography.

Background

The mammalian target of rapamycin (mTOR, FRAP, RAFT) is a Ser/Thr protein kinase (1-3) that functions as an ATP and amino acid sensor to balance nutrient availability and cell growth (4,5). When sufficient nutrients are available, mTOR responds to a phosphatidic acid-mediated signal to transmit a positive signal to p70 S6 kinase and participate in the inactivation of the eIF4E inhibitor, 4E-BP1 (6). These events result in the translation of specific mRNA subpopulations. mTOR is phosphorylated at Ser2448 via the PI3 kinase/Akt signaling pathway and autophosphorylated at Ser2481 (7,8). mTOR plays a key role in cell growth and homeostasis and may be abnormally regulated in tumors. For these reasons, mTOR is currently under investigation as a potential target for anti-cancer therapy (9).

  1. Sabers, C.J. et al. (1995) J Biol Chem 270, 815-22.
  2. Brown, E.J. et al. (1994) Nature 369, 756-8.
  3. Sabatini, D.M. et al. (1994) Cell 78, 35-43.
  4. Gingras, A.C. et al. (2001) Genes Dev 15, 807-26.
  5. Dennis, P.B. et al. (2001) Science 294, 1102-5.
  6. Fang, Y. et al. (2001) Science 294, 1942-5.
  7. Navé, B.T. et al. (1999) Biochem J 344 Pt 2, 427-31.
  8. Peterson, R.T. et al. (2000) J Biol Chem 275, 7416-23.
  9. Huang, S. and Houghton, P.J. (2003) Curr Opin Pharmacol 3, 371-7.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting W-S: Simple Western™ IP: Immunoprecipitation

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 4
#2972

mTOR Antibody

Western Blotting Image 1: mTOR Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from control HEK293 cells (Lane 1) or HEK293 cells with a targeted mutation in the gene encoding mTOR (Lane 2) using mTOR Antibody (upper) or β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (lower). The change in mTOR molecular weight in the mutated HEK293 cells confirms the specificity of the antibody for mTOR.
Western Blotting Image 2: mTOR Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from HeLa cells, transfected with either control siRNA (-) or mTOR siRNA (+). mTOR was detected using mTOR Antibody #2972, and eIF4B was detected using eIF4B Antibody #3592. The mTOR Antibody confirms silencing of mTOR expression, and the eIF4B Antibody is used to control for loading and siRNA specificity.
Western Blotting Image 3: mTOR Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from 293 cells (starved for 16 hours), untreated or EGF-treated (100 ng/ml), using Phospho-mTOR (Ser2448) antibody #2971 (upper) or mTOR Antibody (lower).
Western Blotting Image 4: mTOR Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from various cell lines using mTOR Antibody.
Western Blotting Image 1: mTOR Antibody Expand Image
Simple Western™ analysis of lysates (1.0 mg/mL) from Hela cells using mTOR Antibody #2972. The virtual lane view (left) shows a single target band (as indicated) at 1:10 and 1:50 dilutions of primary antibody. The corresponding electropherogram view (right) plots chemiluminescence by molecular weight along the capillary at 1:10 (blue line) and 1:50 (green line) dilutions of primary antibody. This experiment was performed under reducing conditions on the Jess™ Simple Western instrument from ProteinSimple, a BioTechne brand, using the 66-440 kDa separation module.
No image available