Revision 1

#2750Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IHC-P, IF-IC, FC-FP, ChIP

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

45

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#Q01860

Entrez-Gene Id:

5460

Product Information

Product Usage Information

For optimal ChIP results, use 20 μl of antibody and 10 μg of chromatin (approximately 4 x 106 cells) per IP. This antibody has been validated using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kits.

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunohistochemistry (Paraffin) 1:800
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:200
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:400
Chromatin IP 1:25

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Oct-4 Antibody detects endogenous levels of total Oct-4 protein.

Species Reactivity:

Human

Species predicted to react based on 100% sequence homology

Monkey

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to amino acids near the carboxy terminus of human Oct-4. Antibodies are purified by peptide affinity chromatography.

Background

Oct-4 (POU5F1) is a transcription factor highly expressed in undifferentiated embryonic stem cells and embryonic germ cells (1). A network of key factors that includes Oct-4, Nanog, and Sox2 is necessary for the maintenance of pluripotent potential, and downregulation of Oct-4 has been shown to trigger cell differentiation (2,3). Research studies have demonstrated that Oct-4 is a useful germ cell tumor marker (4). Oct-4 exists as two splice variants, Oct-4A and Oct-4B (5). Recent studies have suggested that the Oct-4A isoform has the ability to confer and sustain pluripotency, while Oct-4B may exist in some somatic, non-pluripotent cells (6,7).

  1. Looijenga, L.H. et al. (2003) Cancer Res 63, 2244-50.
  2. Pesce, M. and Schöler, H.R. (2001) Stem Cells 19, 271-278.
  3. Pan, G. and Thomson, J.A. (2007) Cell Res 17, 42-9.
  4. Cheng, L. et al. (2007) J Pathol 211, 1-9.
  5. Takeda, J. et al. (1992) Nucleic Acids Res 20, 4613-20.
  6. Cauffman, G. et al. (2006) Stem Cells 24, 2685-91.
  7. Lee, J. et al. (2006) J Biol Chem 281, 33554-65.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IHC-P: Immunohistochemistry (Paraffin) IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry) FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) ChIP: Chromatin IP

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
Alexa Fluor is a registered trademark of Life Technologies Corporation.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

使用に関する制限

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Revision 1
#2750

Oct-4 Antibody

Western Blotting Image 1: Oct-4 Antibody Expand Image
Western blot analysis of NCCIT and NTERA2 cell extracts using Oct-4 Antibody.
Immunohistochemistry Image 1: Oct-4 Antibody Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human seminoma (left) or normal testis (right), showing nuclear localization using Oct-4 Antibody.
Immunofluorescence Image 1: Oct-4 Antibody Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of NCCIT cells using Oct-4 Antibody (green) and β-Tubulin (9F3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate) #2116 (red).
Flow Cytometry Image 1: Oct-4 Antibody Expand Image
Flow cytometric analysis of NCCIT cells using Oct-4 Antibody (solid line) compared to concentration-matched Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (dashed lines). Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab’)2 Fragment (Alex Fluor® 488 Conjugate) #4412 was used as a secondary antibody.
Chromatin Immunoprecipitation Image 1: Oct-4 Antibody Expand Image
Chromatin immunoprecipitations were performed with cross-linked chromatin from NCCIT cells and either Oct-4 Antibody #2750 or Normal Rabbit IgG #2729 using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003. The enriched DNA was quantified by real-time PCR using SimpleChIP® Human Oct-4 Promoter Primers #4641, SimpleChIP® Human Sox2 Promoter Primers #4649, and SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486. The amount of immunoprecipitated DNA in each sample is represented as signal relative to the total amount of input chromatin, which is equivalent to one.