Revision 1

#59019Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC, ChIP

REACTIVITY:

H Mk

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

48

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#Q06710

Entrez-Gene Id:

7849

Product Information

Product Usage Information

For optimal ChIP results, use 10 μl of antibody and 10 μg of chromatin (approximately 4 x 106 cells) per IP. This antibody has been validated using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kits.

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:200
Chromatin IP 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

PAX8 (D2S2I) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total PAX8 protein. PAX8 (D2S2I) Rabbit mAb may detect other isoforms of Pax8.

Species Reactivity:

Human, Monkey

Species predicted to react based on 100% sequence homology

Rat

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Gly274 of human PAX8 protein.

Background

Paired box (PAX) proteins are a family of transcription factors that play important and diverse roles in animal development (1). Nine PAX proteins (PAX1-9) have been described in humans and other mammals. They are defined by the presence of an amino-terminal "paired" domain, consisting of two helix-turn-helix motifs, with DNA binding activity (2). PAX proteins are classified into four structurally distinct subgroups (I-IV) based on the absence or presence of a carboxy-terminal homeodomain and a central octapeptide region. Subgroup I (PAX1 and 9) contains the octapeptide but lacks the homeodomain; subgroup II (PAX2, 5, and 8) contains the octapeptide and a truncated homeodomain; subgroup III (PAX3 and 7) contains the octapeptide and a complete homeodomain; and subgroup IV (PAX4 and 6) contains a complete homeodomain but lacks the octapeptide region (2). PAX proteins play critically important roles in development by regulating transcriptional networks responsible for embryonic patterning and organogenesis (3); a subset of PAX proteins also maintain functional importance during postnatal development (4). Research studies have implicated genetic mutations that result in aberrant expression of PAX genes in a number of cancer subtypes (1-3), with members of subgroups II and III identified as potential mediators of tumor progression (2).
PAX8 is involved in the development of thyroid follicular cells and the expression of thyroid-specific genes (5). Investigators have associated mutations in the PAX8 gene with thyroid dysgenesis, thyroid follicular carcinomas, and atypical follicular thyroid adenomas (6,7).

  1. Lang, D. et al. (2007) Biochem Pharmacol 73, 1-14.
  2. Robson, E.J. et al. (2006) Nat Rev Cancer 6, 52-62.
  3. Wang, Q. et al. (2008) J Cell Mol Med 12, 2281-94.
  4. Blake, J.A. et al. (2008) Dev Dyn 237, 2791-803.
  5. Kimura, S. (2011) J Thyroid Res 2011, 710213.
  6. Fagman, H. and Nilsson, M. (2011) J Mol Endocrinol 46, R33-42.
  7. Albarel, F. et al. (2012) Ann Endocrinol (Paris) 73, 155-64.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry) ChIP: Chromatin IP

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
SimpleChIP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#59019

PAX8 (D2S2I) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: PAX8 (D2S2I) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from ACHN, OVCAR3, and IGROV-1 cells using PAX8 (D2S2I) Rabbit mAb.
No image available
Immunofluorescence Image 1: PAX8 (D2S2I) Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of OVCAR3 (left) and HeLa (right) cells using PAX8 (D2S2I) Rabbit mAb (green). Actin filaments were labeled with DyLight 554 Phalloidin #13054 (red).
Chromatin Immunoprecipitation Image 1: PAX8 (D2S2I) Rabbit mAb Expand Image
Chromatin immunoprecipitations were performed with cross-linked chromatin from 786-O cells and either PAX8 (D2S2I) Rabbit mAb #59019, or Normal Rabbit IgG #2729, using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003. The enriched DNA was quantified by Real-Time PCR using SimpleChIP® Human CTGF Promoter Primers #14927, human PAX8 promoter primers, and SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486. The amount of immunoprecipitated DNA in each sample is represented as signal relative to the total amount of input chromatin, which is equivalent to one.