Revision 1
Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Transfected Only

MW (kDa):

110-130, 125-140, 180-200

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#Q06418, #P30530, #Q12866

Entrez-Gene Id:

7301, 558, 10461

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Phospho-Axl (Tyr698)/Mer (Tyr749)/Tyro3 (Tyr681) (D6M4W) Rabbit mAb detects immunoprecipitated or transfected levels of Axl/Mer/Tyro3 protein phosphorylated at Axl (Tyr698)/Mer (Tyr749)/Tyro3 (Tyr681). The antibody may cross-react with other phosphorylated tyrosine proteins.

Species Reactivity:

Human

Species predicted to react based on 100% sequence homology

Mouse, Rat

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with synthetic phospho-peptides corresponding to residues surrounding Tyr698/Tyr749 of human Axl/Mer protein.

Background

Axl, Mer and Tyro3 are three members of the TAM family receptor tyrosine kinase that share a common NCAM (neural adhesion molecule)-related extracellular domain and a conserved intracellular tyrosine kinase domain. These receptors bind common homologous vitamin K dependent protein GAS6 and protein S to activate downstream signaling pathways (1). TAM family receptors are involved in the development of immune, nervous, vascular and reproductive systems, autoimmune disease, cancer drug resistance and tumor immunity response (2-5). Axl (Tyr698), Axl (Tyr702), Mer Tyr(749) and Tyro3 (Tyr681) are conserved autophosphorylation sites located in the activation loop of the respective tyrosine kinase domains. Phosphorylation at these sites is required for full kinase activation of each of the corresponding receptors (6,7).

  1. Rothlin, C.V. et al. (2015) Annu Rev Immunol 33, 355-91.
  2. Burstyn-Cohen, T. (2017) Int J Dev Biol 61, 215-24.
  3. Bellan, M. et al. (2016) Int J Mol Sci 17, pii: E1807.
  4. Schoumacher, M. and Burbridge, M. (2017) Curr Oncol Rep 19, 19.
  5. Akalu, Y.T. et al. (2017) Immunol Rev 276, 165-77.
  6. Ling, L. et al. (1996) J Biol Chem 271, 18355-62.
  7. Onken, J. et al. (2017) Oncotarget 8, 50403-14.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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Revision 1
#44463

Phospho-Axl (Tyr698)/Mer (Tyr749)/Tyro3 (Tyr681) (D6M4W) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: Phospho-Axl (Tyr698)/Mer (Tyr749)/Tyro3 (Tyr681) (D6M4W) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from NCI-H1299 and SK-MEL-5 cells, untreated (-) or treated with GAS6 (400 ng/ml) and H2O2 (4 mM) for 10 min, using Phospho-Axl (Tyr698)/Mer (Tyr749)/Tyro3 (Tyr681) (D6M4W) Rabbit mAb (upper) and Axl (C89E7) Rabbit mAb #8661 (lower 1), Mer (D21F11) XP® Rabbit mAb #4319 (lower 2), and Tyro3 (D38C6) Rabbit mAb #5585 (lower 3).
Immunoprecipitation Image 1: Phospho-Axl (Tyr698)/Mer (Tyr749)/Tyro3 (Tyr681) (D6M4W) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of Phospho-Axl (Tyr698) protein from NCI-H1299 cells treated with GAS6 (400 ng/ml) and H2O2 (4 mM) for 10 min. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, lane 3 is Phospho-Axl (Tyr698)/Mer (Tyr749)/Tyro3 (Tyr681) Rabbit mAb, and lane 4 is Axl (C89E7) Rabbit mAb #8661. Western blot analysis was performed using Phospho-Axl (Tyr698)/Mer (Tyr749)/Tyro3 (Tyr681) Rabbit mAb (upper) and Axl (C89E7) Rabbit mAb #8661 (lower). Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 was used as secondary antibody.
Immunoprecipitation Image 2: Phospho-Axl (Tyr698)/Mer (Tyr749)/Tyro3 (Tyr681) (D6M4W) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of Phospho-Mer (Tyr749) protein from SK-MEL-5 cells treated with GAS6 (400 ng/ml) and H2O2 (4 mM) for 10 min. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, lane 3 is Phospho-Axl (Tyr698)/Mer (Tyr749)/Tyro3 (Tyr681) Rabbit mAb, and lane 4 is Mer(D21F11) XP® Rabbit mAb #4319. Western blot analysis was performed using Phospho-Axl (Tyr698)/Mer (Tyr749)/Tyro3 (Tyr681) Rabbit mAb (upper) and Mer (D21F11) XP® Rabbit mAb #4319 (lower). Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 was used as secondary antibody.
Immunoprecipitation Image 3: Phospho-Axl (Tyr698)/Mer (Tyr749)/Tyro3 (Tyr681) (D6M4W) Rabbit mAb Expand Image
Immunoprecipitation of Phospho-Tyro3 (Tyr681) protein from SK-MEL-5 cells treated with GAS6 (400 ng/ml) and H2O2 (4 mM) for 10 min. Lane 1 is 10% input, lane 2 is Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900, lane 3 is Phospho-Axl (Tyr698)/Mer (Tyr749)/Tyro3 (Tyr681) Rabbit mAb, and lane 4 is Tyro 3 (D38C6) Rabbit mAb #5585. Western blot analysis was performed using Phospho-Axl (Tyr698)/Mer (Tyr749)/Tyro3 (Tyr681) Rabbit mAb (upper) and Tyro3 (D38C6) Rabbit mAb #5585 (lower). Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 was used as secondary antibody.