Revision 1

#65060Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

68,70

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#Q8WV28

Entrez-Gene Id:

29760

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Phospho-BLNK (Tyr84) Antibody recognizes endogenous levels of BLNK protein only when phosphorylated at Tyr84. This antibody cross-reacts with phospho-Her2.

Species Reactivity:

Human

Species predicted to react based on 100% sequence homology

Mouse, Rat

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic phosphopeptide corresponding to residues surrounding Tyr84 of human BLNK protein. Antibodies are purified by protein A and peptide affinity chromatography.

Background

B cell linker protein (BLNK), also known as SLP-65 or BASH, is an adaptor molecule that plays key roles in B cell activation and B cell antigen receptor (BCR) engagement. BLNK acts at the interface between BCR-associated Syk and downstream signaling cascades (1,2). BLNK has multiple SH2 binding motifs (YXXP) at its amino terminus and an SH2 domain at its carboxy terminus. After BCR ligation, BLNK is phosphorylated by Syk at multiple YXXP motifs, including Tyr72, Tyr84, Tyr96, and Tyr178 (1). These phosphorylated motifs provide docking sites for signaling molecules, such as BTK, PLCγ, and Vav. These signaling molecules bind to BLNK through their SH2 domains and together activate downstream signaling pathways (3,4). Through its SH2 domain, BLNK can also interact with tyrosine-phosphorylated targets, such as HPK1, thereby recruiting them to the BCR complex for signaling (5).

  1. Kurosaki, T. and Tsukada, S. (2000) Immunity 12, 1-5.
  2. Fu, C. et al. (1998) Immunity 9, 93-103.
  3. Ishiai, M. et al. (1999) Immunity 10, 117-25.
  4. Baba, Y. et al. (2001) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 98, 2582-86.
  5. Tsuji, S. et al. (2001) J. Exp. Med. 194, 529-39.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v nonfat dry milk, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#65060

Phospho-BLNK (Tyr84) Antibody

Western Blotting Image 1: Phospho-BLNK (Tyr84) Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from Ramos cells, untreated (-) or treated with anti-human IgM (12μg/ml, 10 min), using Phospho-BLNK (Tyr84) Antibody (upper) or BLNK (D3P2H) XP® Rabbit mAb #36438 (lower).
Immunoprecipitation Image 1: Phospho-BLNK (Tyr84) Antibody Expand Image
Immunoprecipitation of Phospho-BLNK (Tyr84) from Ramos cell extracts treated with anti-human IgM (12 μg/ml, 5 min). Lane 1 is 10% input, lane 2 is Normal Rabbit IgG #2729, and lane 3 is Phospho-BLNK (Tyr84) Antibody. Western blot analysis was performed using Phospho-BLNK (Tyr84) Antibody.