Revision 1
Cell Signaling Technology

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Transfected Only

MW (kDa):

80

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#P20393

Entrez-Gene Id:

9572

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Phospho-Rev-erbα (Ser55/59) Antibody detects transfected levels of Rev-erbα protein when phosphorylated at Ser55/59. The antibody does not cross-react with other nuclear receptor proteins, including Rev-erbβ.

Species Reactivity:

Human

Species predicted to react based on 100% sequence homology

Mouse, Rat, Bovine

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic phosphopeptide corresponding to residues surrounding Ser55 and Ser59 of human Rev-erbα. Antibodies are purified by protein A and peptide affinity chromatography.

Background

Reverse orientation c-erbA gene α (Rev-erbα, EAR-1, or NR1D1) is a widely expressed member of the orphan nuclear receptor family of proteins (1). Rev-erbα is highly expressed in adipose tissue, skeletal muscle, brain and liver, and regulates cellular proliferation and differentiation. Expression increases during differentiation in adipocytes and ectopic expression of Rev-erbα potentiates the adipocyte differentiation of 3T3-L1 cells (2). In addition, expression oscillates with circadian rhythm in liver cells and Rev-erbα regulates expression of BMAL1, ApoA-I and ApoC-III, all key regulators of circadian rhythm (3-7). Phosphorylation of Rev-erbα Ser55 and Ser59 by GSK-3β appears to stabilize Rev-erbα protein levels and is important for synchronizing and maintaining the circadian clock (8). Rev-erbα also regulates inflammation by targeting the NF-κB responsive genes IL-6 and COX-2 (9). Rev-erbα lacks the activation function 2 domain required for ligand-dependent activation of transcription by other members of the nuclear receptor family; thus it behaves as a constitutive repressor protein, recruiting the nuclear receptor co-repressor (N-CoR)/HDAC3 complex to target genes to repress transcription (10).

  1. Harding, H.P. and Lazar, M.A. (1993) Mol Cell Biol 13, 3113-21.
  2. Chawla, A. and Lazar, M.A. (1993) J Biol Chem 268, 16265-9.
  3. Torra, I.P. et al. (2000) Endocrinology 141, 3799-806.
  4. Preitner, N. et al. (2002) Cell 110, 251-60.
  5. Vu-Dac, N. et al. (1998) J Biol Chem 273, 25713-20.
  6. Coste, H. and Rodríguez, J.C. (2002) J Biol Chem 277, 27120-9.
  7. Raspé, E. et al. (2002) J Lipid Res 43, 2172-9.
  8. Yin, L. et al. (2006) Science 311, 1002-5.
  9. Migita, H. et al. (2004) FEBS Lett 561, 69-74.
  10. Yin, L. and Lazar, M.A. (2005) Mol Endocrinol 19, 1452-9.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

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Revision 1
#2129

Phospho-Rev-erbα (Ser55/59) Antibody

Western Blotting Image 1: Phospho-Rev-erbα (Ser55/59) Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from 293 cells, either untransfected or transfected with DYKDDDDK-tagged Rev-erbα expression constructs, using Phospho-Rev-erbα (Ser55/Ser59) Antibody (upper) or DYKDDDDK Tag Antibody (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) #2368 (lower). The phospho-specificity of the antibody was verified by transfecting cells with a mutant DYKDDDDK-Rev-erbα (Ser55/59Ala) expression construct and by incubating 293/Rev-erbα (WT) extracts with (+) or without (-) λ phosphatase.