Revision 4
Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC, FC-FP, ChIP

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

81

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#Q14765

Entrez-Gene Id:

6775

Product Information

Product Usage Information

For optimal ChIP results, use 10 μl of antibody and 10 μg of chromatin (approximately 4 x 106 cells) per IP. This antibody has been validated using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kits.

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:100
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:1600 - 1:3200
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:1600
Chromatin IP 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

For a carrier free (BSA and azide free) version of this product see product #42353.

Specificity / Sensitivity

Phospho-Stat4 (Tyr693) (D2E4) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of Stat4 protein only when phosphorylated at Tyr693.

Species Reactivity:

Human

Species predicted to react based on 100% sequence homology

Mouse, Rat, Monkey, Pig

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Tyr693 of human Stat4 protein.

Background

The Jak-Stat signaling pathway is utilized by a large number of cytokines, growth factors, and hormones (1). Receptor-mediated tyrosine phosphorylation of Jak family members triggers phosphorylation of Stat proteins, resulting in their nuclear translocation, binding to specific DNA elements, and subsequent activation of transcription. The remarkable range and specificity of responses regulated by the Stats is determined, in part, by the tissue-specific expression of different cytokine receptors, Jaks, and Stats, as well as by the combinatorial coupling of various Stat members to different receptors (2). Stat4 is predominantly expressed in the spleen, thymus, and testis and has been most extensively investigated as the mediator of IL-12 responses (3-8). Activation of Stat4 is associated with phosphorylation at Tyr693 (9).
Stat4 is activated in response to IL-2 in natural killer (NK) cells, but not in T cells (10).

  1. Darnell, J.E. et al. (1994) Science 264, 1415-1421.
  2. Leonard, W.J. and O'Shea, J.J. (1998) Annu. Rev. Immunol. 16, 293-322.
  3. Zhong, Z. et al. (1994) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91, 4806-4810.
  4. Yamamoto, K. et al. (1994) Mol. Cell Biol. 14, 4342-4349.
  5. Jacobson, N.G. et al. (1995) J. Exp. Med. 181, 1755-1762.
  6. Bacon, C.M. et al. (1995) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92, 7307-7311.
  7. Thierfelder, W.E. et al. (1996) Nature 382, 171-174.
  8. Kaplan, M.H. et al. (1996) Nature 382, 174-177.
  9. Visconti, R. et al. (2000) Blood 96, 1844-52.
  10. Wang, K.S. et al. (1999) J Immunol 162, 299-304.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry) FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) ChIP: Chromatin IP

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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