Revision 1

#4491Store at -20C

Cell Signaling Technology

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB

REACTIVITY:

R

SENSITIVITY:

Transfected Only

MW (kDa):

60, 62

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#P41279

Entrez-Gene Id:

1326

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Phospho-Tpl2 (Ser400) Antibody detects transfected Tpl2 only when phosphorylated at Ser400. This antibody does not cross-react with other phosphorylated MAP kinase kinase kinases.

Species Reactivity:

Rat

Species predicted to react based on 100% sequence homology

Human, Mouse

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a mixture synthetic phosphorylated peptides corresponding to residues surrounding Ser400 of human, mouse and rat Tpl2. Antibodies are purified by protein A and peptide affinity chromatography.

Background

Tpl2 (tumor progression locus 2), also known as COT (cancer osaka thyroid), is a serine/threonine kinase expressed primarily in hematopoietic tissues, lung and liver (1). Over-expression of Tpl2 potentiates MAP kinase pathways through MEK1 and SEK1, as well as through MKK6 and MEK5 (2,3). Tpl2 is also engaged in NF-κB activation through NF-κB inducing kinase (NIK), or by inducing phosphorylation and degradation of the NF-κB precusor, p105 NF-κB1 (4,5). Ser400 of Tpl2 is phosphorylated in an Akt-dependent manner. This phosphorylation is required for Tpl2-induced NF-κB-dependent transcription (6). Tpl2 also activates caspase-3 by promoting the assembly of a protein complex of Apaf1 (apoptotic protease-activating factor 1), caspase-9, Tpl2, adaptor protein Tvl1 and procaspase-3 (7).

  1. Patriotis, C. et al. (1993) Proc Natl Acad Sci U S A 90, 2251-5.
  2. Salmeron, A. et al. (1996) EMBO J 15, 817-26.
  3. Chiariello, M. et al. (2000) Mol Cell Biol 20, 1747-58.
  4. Lin, X. et al. (1999) Immunity 10, 271-80.
  5. Belich, M.P. et al. (1999) Nature 397, 363-8.
  6. Kane, L.P. et al. (2002) Mol Cell Biol 22, 5962-74.
  7. Patriotis, C. et al. (2001) J Cell Physiol 187, 176-87.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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Revision 1
#4491

Phospho-Tpl2 (Ser400) Antibody

Western Blotting Image 1: Phospho-Tpl2 (Ser400) Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from COS cells, untransfected or transfected with rat Tpl2 , using Phospho-Tpl2 (Ser400) Antibody (upper) and Tpl2 Antibody #4492 (lower). In lane 3, Tpl2 transfected COS cell lysate was treated with λ phosphatase to demonstrate the phospho-specificity of Phospho-Tpl2 (Ser400) Antibody.