Revision 3

#2443Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC, ChIP, ChIP-seq

REACTIVITY:

H M

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

53, 57

Source/Isotype:

Rabbit 

UniProt ID:

#P37231

Entrez-Gene Id:

5468

Product Information

Product Usage Information

For optimal ChIP and ChIP-seq results, use 5 μl of antibody and 10 μg of chromatin (approximately 4 x 106 cells) per IP. This antibody has been validated using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kits.
Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:100
Chromatin IP 1:100
Chromatin IP-seq 1:100

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

PPARγ (81B8) Rabbit mAb detects endogenous levels of total PPARγ protein.

Species Reactivity:

Human, Mouse

Species predicted to react based on 100% sequence homology

Rat

Source / Purification

PPARγ (81B8) Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding His494 of human PPARγ.

Background

Peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) is a member of the ligand-activated nuclear receptor superfamily and functions as a transcriptional activator (1). PPARγ is preferentially expressed in adipocytes as well as in vascular smooth muscle cells and macrophage (2). Besides its role in mediating adipogenesis and lipid metabolism (2), PPARγ also modulates insulin sensitivity, cell proliferation and inflammation (3). PPARγ transcriptional activity is inhibited by MAP kinase phosphorylation of PPARγ at Ser84 (4,5).

  1. Tontonoz, P. et al. (1995) Curr. Opin. Genet. Dev. 5, 571-576.
  2. Rosen, E.D. et al. (1999) Mol. Cell 4, 611-617.
  3. Murphy, G.J. and Holder, J.C. (2000) Trends Pharmacol. Sci. 21, 469-474.
  4. Camp, H.S. and Tafuri, S.R. (1997) J. Biol. Chem. 272, 10811-10816.
  5. Adams, M. et al. (1997) J. Biol. Chem. 272, 5128-5132.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry) ChIP: Chromatin IP ChIP-seq: Chromatin IP-seq

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

使用に関する制限

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Revision 3
#2443

PPARγ (81B8) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: PPARγ (81B8) Rabbit mAb Expand Image
Western blot analysis of extracts from NIH/3T3 and 3T3-L1 cells (differentiated 6 days) using PPARγ (81B8) Rabbit mAb.
No image available
Immunofluorescence Image 1: PPARγ (81B8) Rabbit mAb Expand Image
Confocal immunofluorescent analysis of 3T3-L1 cells, using PPARγ (81B8) Rabbit mAb (red) showing nuclear localization in differentiated cells. Lipid droplets have been labeled with BODIPY 493/503 (green). Blue pseudocolor = DRAQ5® #4084 (fluorescent DNA dye).
Chromatin Immunoprecipitation Image 1: PPARγ (81B8) Rabbit mAb Expand Image
Chromatin immunoprecipitations were performed with cross-linked chromatin from untreated HDLM-2 cells and PPARγ (81B8) Rabbit mAb, using SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005. DNA Library was prepared using DNA Library Prep Kit for Illumina Systems (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795. The figure shows binding across STON2, a known target gene of PPARγ (see additional figure containing ChIP-qPCR data).
Chromatin Immunoprecipitation Image 2: PPARγ (81B8) Rabbit mAb Expand Image
Chromatin immunoprecipitations were performed with cross-linked chromatin from untreated HDLM-2 cells and PPARγ (81B8) Rabbit mAb, using SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005. DNA Library was prepared using DNA Library Prep Kit for Illumina Systems (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795. The figures show binding across chromosome 14 (upper), including STON2 (lower), a known target gene of PPARγ (see additional figure containing ChIP-qPCR data).
Chromatin Immunoprecipitation Image 3: PPARγ (81B8) Rabbit mAb Expand Image
Chromatin immunoprecipitations were performed with cross-linked chromatin from HDLM-2 cells and either PPARγ (81B8) Rabbit mAb or Normal Rabbit IgG #2729 using SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005. The enriched DNA was quantified by real-time PCR using SimpleChIP® Human FOXN3 Intron3 Primers #95568, STON2 intron 4 primers, and SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486. The amount of immunoprecipitated DNA in each sample is represented as signal relative to the total amount of input chromatin, which is equivalent to one.