Revision 1

#12636Store at -20C

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

86

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#P57078

Entrez-Gene Id:

54101

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunoprecipitation 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

RIP4 Antibody recognizes endogenous levels of total RIP4 protein.

Species Reactivity:

Human

Species predicted to react based on 100% sequence homology

Monkey

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues near the carboxy terminus of human RIP4 protein. Antibodies are purified by protein A and peptide affinity chromatography.

Background

The receptor-interacting protein (RIP) family of serine-threonine kinases (RIP, RIP2, RIP3, and RIP4) are important regulators of cellular stress that trigger pro-survival and inflammatory responses through the activation of NF-κB, as well as pro-apoptotic pathways (1). In addition to the kinase domain, RIP contains a death domain responsible for interaction with the death domain receptor Fas and recruitment to TNF-R1 through interaction with TRADD (2,3). RIP-deficient cells show a failure in TNF-mediated NF-κB activation, making the cells more sensitive to apoptosis (4,5). RIP also interacts with TNF-receptor-associated factors (TRAFs) and can recruit IKKs to the TNF-R1 signaling complex via interaction with NEMO, leading to IκB phosphorylation and degradation (6,7). Overexpression of RIP induces both NF-κB activation and apoptosis (2,3). Caspase-8-dependent cleavage of the RIP death domain can trigger the apoptotic activity of RIP (8).
Receptor-interacting serine-threonine kinase 4 (RIP4, ANKRD3, DIK, PKK, or RIPK4) is a membrane-associated, ankyrin repeat-containing member of the RIP family first identified in HaCat cells (9,10). RIP4 has been shown to be involved in keratinocyte differentiation in vivo as well as wound repair (11-13). Studies indicate that siRNA knockdown of RIP4 in human xenografted tumor cells suppresses Wnt-dependent growth while over-expression of RIP4 in vitro stabilized β-catenin and lead to an increase in Wnt-dependent gene expression (14).

  1. Meylan, E. and Tschopp, J. (2005) Trends Biochem Sci 30, 151-9.
  2. Hsu, H. et al. (1996) Immunity 4, 387-96.
  3. Stanger, B.Z. et al. (1995) Cell 81, 513-23.
  4. Ting, A.T. et al. (1996) EMBO J 15, 6189-96.
  5. Kelliher, M.A. et al. (1998) Immunity 8, 297-303.
  6. Devin, A. et al. (2000) Immunity 12, 419-29.
  7. Zhang, S.Q. et al. (2000) Immunity 12, 301-11.
  8. Lin, Y. et al. (1999) Genes Dev 13, 2514-26.
  9. Bhr, C. et al. (2000) J Biol Chem 275, 36350-7.
  10. Chen, L. et al. (2001) J Biol Chem 276, 21737-44.
  11. Rountree, R.B. et al. (2010) J Invest Dermatol 130, 102-12.
  12. Adams, S. et al. (2007) J Invest Dermatol 127, 538-44.
  13. Holland, P. et al. (2002) Curr Biol 12, 1424-8.
  14. Huang, X. et al. (2013) Science 339, 1441-5.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 1
#12636

RIP4 Antibody

Western Blotting Image 1: RIP4 Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from PANC-1, Malme-3M, and 786-O cells using RIP4 Antibody.
Western Blotting Image 2: RIP4 Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from 293T cells, mock transfected (-) or transfected with a construct expressing Myc/DDK-tagged full-length human RIP4 isoform 2 (hRIP4-Myc/DDK; +), using RIP4 Antibody.
Immunoprecipitation Image 1: RIP4 Antibody Expand Image
Immunoprecipitation of RIP4 from PANC-1 cell extracts, using Normal Rabbit IgG #2729 (lane 2) or RIP4 Antibody (lane 3). Lane 1 is 10% input. Western blot was performed using RIP4 Antibody. Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb #3678 was used as a secondary antibody to avoid detection of IgG.