Revision 5

#3933Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IHC-P

REACTIVITY:

All

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

SOURCE:

Rabbit

UniProt ID:

#P62987, #P0CG48, #P0CG47, #P62979

Entrez-Gene Id:

7311, 7316, 7314, 6233

Product Information

Product Usage Information

Application Dilution
Western Blotting 1:1000
Immunohistochemistry (Paraffin) 1:1200

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

Ubiquitin Antibody detects ubiquitin, polyubiquitin and ubiquitinated proteins. This antibody may cross-react with recombinant NEDD8.

Species Reactivity:

All Species Expected

Species predicted to react based on 100% sequence homology

D. melanogaster, Xenopus, Zebrafish, Bovine, Pig, Horse

Source / Purification

Polyclonal antibodies are produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to the amino terminus of the human ubiquitin protein. Antibodies are purified by protein A and peptide affinity chromatography.

Background

Ubiquitin is a conserved polypeptide unit that plays an important role in the ubiquitin-proteasome pathway. Ubiquitin can be covalently linked to many cellular proteins by the ubiquitination process, which targets proteins for degradation by the 26S proteasome. Three components are involved in the target protein-ubiquitin conjugation process. Ubiquitin is first activated by forming a thiolester complex with the activation component E1; the activated ubiquitin is subsequently transferred to the ubiquitin-carrier protein E2, then from E2 to ubiquitin ligase E3 for final delivery to the epsilon-NH2 of the target protein lysine residue (1-3). The ubiquitin-proteasome pathway has been implicated in a wide range of normal biological processes and in disease-related abnormalities. Several proteins such as IκB, p53, cdc25A, and Bcl-2 have been shown to be targets for the ubiquitin-proteasome process as part of regulation of cell cycle progression, differentiation, cell stress response, and apoptosis (4-7).

  1. Ciechanover, A. (1998) EMBO J 17, 7151-60.
  2. Hochstrasser, M. (2000) Nat Cell Biol 2, E153-7.
  3. Hochstrasser, M. (2000) Science 289, 563-4.
  4. Bernardi, R. et al. (2000) Oncogene 19, 2447-54.
  5. Aberle, H. et al. (1997) EMBO J 16, 3797-804.
  6. Salomoni, P. and Pandolfi, P.P. (2002) Nat Cell Biol 4, E152-3.
  7. Jesenberger, V. and Jentsch, S. (2002) Nat Rev Mol Cell Biol 3, 112-21.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v nonfat dry milk, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IHC-P: Immunohistochemistry (Paraffin)

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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Revision 5
#3933

Ubiquitin Antibody

Western Blotting Image 1: Ubiquitin Antibody Expand Image
Western blot analysis of extracts from HeLa and NIH/3T3 cells, untreated or treated with the proteasome inhibitor MG132 (10 µM for 90 minutes), using Ubiquitin Antibody.
Immunohistochemistry Image 1: Ubiquitin Antibody Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human breast carcinoma using Ubiquitin Antibody in the presence of control peptide (left) or antigen-specific peptide (right).
Immunohistochemistry Image 2: Ubiquitin Antibody Expand Image
Immunohistochemical analysis of paraffin-embedded human lung carcinoma using Ubiquitin Antibody.