Revision 3

#12216Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
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UniProt ID:

#Q01844

Entrez-Gene Id:

2130

Product Information

Product Usage Information

CST recommends transfection with 100 nM SignalSilence® EWS siRNA II 48 to 72 hours prior to cell lysis. For transfection procedure, follow protocol provided by the transfection reagent manufacturer. Please feel free to contact CST with any questions on use.

Each vial contains the equivalent of 100 transfections, which corresponds to a final siRNA concentration of 100 nM per transfection in a 24-well plate with a total volume of 300 μl per well.

Storage

SignalSilence® siRNA is supplied in RNAse-free water. Aliquot and store at -20ºC.

Specificity / Sensitivity

SignalSilence® EWS siRNA II inhibits human, mouse, rat, and monkey EWS expression.

Species Reactivity:

Human

Species predicted to react based on 100% sequence homology

Mouse, Rat, Monkey

Product Description

SignalSilence® EWS siRNA II from Cell Signaling Technology (CST) allows the researcher to specifically inhibit EWS expression using RNA interference, a method whereby gene expression can be selectively silenced through the delivery of double stranded RNA molecules into the cell. All SignalSilence® siRNA products from CST are rigorously tested in-house and have been shown to reduce target protein expression by western analysis.

Background

The Ewing sarcoma (EWS) protein is a member of the multifunctional FET (FUS, EWS, and TAF15) family of proteins (1,2). These proteins are RNA and DNA binding proteins that are thought to be important for both transcriptional regulation and RNA processing. EWS can be found as part of a fusion protein with various E-twenty six (ETS) family transcription factors, most commonly Fli-1, in the Ewing sarcoma family of tumors (1-4). The amino terminus of the EWS protein, containing the transcriptional activation domain, is fused to the DNA binding domain of the ETS transcription factor, causing aberrant expression of target genes (1-5). EWS interacts with the transcription initiation complex via TFIID and RNA polymerase II subunits, as well as transcriptional regulators, such as Brn3A and CBP/p300, which suggests a role for EWS in transcriptional regulation (1,6-9). EWS also interacts with multiple components of the splicing machinery, implicating a role for EWS in RNA processing (1,10-12). EWS regulates the expression of cyclin D1, which controls G1-S phase transition during the cell cycle, at the level of transcriptional activation and mRNA splicing. The EWS-Fli-1 fusion protein has been shown to promote the expression of the cyclin D1b splice variant in Ewing sarcoma cells (13). In addition, EWS regulates the DNA damage-induced alternative splicing of genes involved in DNA repair and stress response and is required for cell viability upon DNA damage (14). Consistent with these results, EWS knockout mice display hypersensitivity to ionizing radiation and premature cellular senescence, suggesting a role for EWS in homologous recombination and maintenance of genomic stability (15).

  1. Law, W.J. et al. (2006) Brief Funct Genomic Proteomic 5, 8-14.
  2. Kovar, H. (2011) Sarcoma 2011, 837474.
  3. Delattre, O. et al. (1992) Nature 359, 162-5.
  4. May, W.A. et al. (1993) Mol Cell Biol 13, 7393-8.
  5. Sorensen, P.H. et al. (1994) Nat Genet 6, 146-51.
  6. Bertolotti, A. et al. (1996) EMBO J 15, 5022-31.
  7. Bertolotti, A. et al. (1998) Mol Cell Biol 18, 1489-97.
  8. Araya, N. et al. (2003) J Biol Chem 278, 5427-32.
  9. Thomas, G.R. and Latchman, D.S. Cancer Biol Ther 1, 428-32.
  10. Chansky, H.A. et al. (2001) Cancer Res 61, 3586-90.
  11. Yang, L. et al. (2000) J Biol Chem 275, 37612-8.
  12. Knoop, L.L. and Baker, S.J. (2001) J Biol Chem 276, 22317-22.
  13. Sanchez, G. et al. (2008) Proc Natl Acad Sci U S A 105, 6004-9.
  14. Paronetto, M.P. et al. (2011) Mol Cell 43, 353-68.
  15. Li, H. et al. (2007) J Clin Invest 117, 1314-23.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
SignalSilence is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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