注目情報はこちら >>

SignalStar™ Multiplex IHCのよくある質問

質問

回答

SignalStar Multiplex IHCのキットと試薬はどのように検証されていますか？

CSTは、SignalStar Multiplex IHCパネルビルダーでお選びいただける各抗体を入念に検証しています。また、イメージングの両ラウンドにおいて、タイトレーションや蛍光色素との組み合わせを通じて、抗体の様々な条件を試験しています。試験は、様々な腫瘍や組織を用いて行います。また、従来の発色アッセイに用いられる親抗体は、この蛍光アッセイの基礎となるため、厳密に試験されています。

このアッセイは凍結した組織で機能しますか？

SignalStar Multiplex IHCのキットと試薬は、凍結された組織での使用はまだ検証されていません。現在、新鮮な組織または凍結組織で用いるために、弊社の抗体とプロトコールを検証しています。

抗マウス抗体はありますか？

SignalStar Multiplex IHCキットと試薬は、マウス組織での使用に対してはまだ検証されていません。現在、マウスに反応する抗体を検証しています。

抗体のリストに目的の標的が見当たりません。他の方法で手持ちのパネルに追加することができますか？

SignalStar Multiplex IHCキットと試薬は、リストに含まれない抗体の利用についてはまだ検証されていません。現在、SignalStar Multiplex IHCアッセイで、お手持ちの抗体を使用するためのカスタムソリューションを開発中です。

このアッセイに用いる抗体と直接標識を組み合わせることはできますか？

SignalStar Multiplex IHCキットと試薬は、直接標識抗体と組み合わせての使用についてはまだ検証されていません。直接標識抗体をプロトコールに取り入れることは可能であると考えられます。しかし、SignalStar試薬は、蛍光シグナルを増幅するという利点があるため、増幅されていない直接標識抗体と共に使用した際に、スペクトルの漏れ込みが発生する可能性があります。

連続切片のSignalStar染色を発色染色と比較すると、より多くの陽性細胞が見えます。この過剰な染色が正しいどうかを、どのように確認すれば良いですか？

最適化の過程で、蛍光染色は発色染色よりも高い陽性率を示す可能性があることが分かりました。過剰な染色が特異的であることを確認するには、細胞内局在や、他の染色と共局在性が正しいことを確認してください。例えば、すべてのCD8陽性細胞がCD3陽性である場合、発色染色と比較して過剰なCD8陽性細胞は、正しい染色である可能性が高くなります。

染色が完了してからスライドをイメージングするまで、どのぐらいの時間を置くことができますか？

1回目のイメージングラウンドは、染色完了後、最大8時間後までのイメージングにおいて強いシグナルを示すと考えられます。2回目のイメージングラウンドでは、イメージングは染色完了後に可能な限り速やかに行うべきですが、最大8時間後まではシグナルは強いと考えられます。

SignalStarキットと試薬は、使用を予定している組織に対して最適化する必要がありますか？

SignalStar Multiplex IHCのキットと試薬は、蛍光色素の組み合わせと抗体の染色順について最適化されています。標的の特性と発現レベルは組織によって異なるため、パネル内の抗体濃度を2倍に増やす、または0.5倍に減らすなどの調整により実験で最適なシグナルを得ることができます。

このアッセイに含むべき適切なポジティブコントロールは何ですか？複数のコントロールが必要ですか？

各標的について、発色IHCで陽性であることことが示されたあらゆる組織が、ポジティブコントロール組織として機能します。標的ごとにポジティブコントロールが必要であるため、複数のコントロールが必要になる場合もあります。最適な比較を行うために、切片は可能な限り連続に近いものを用いてください。

ご質問は、CSTのSignalStarグループ ([保護されたメール]) まで、直接お問い合わせください。

詳細を表示する