SignalStar™ Fluorescence Removal Kit #32722
- IHC
Product Information
Product Description
The SignalStar Fluorescence Removal Kit is compatible with SignalStar Oligo-Antibody Pairs, SignalStar Midplex IHC Buffer Kit #29414, and SignalStar Miniplex IHC Buffer Kit #63043 for use in fluorescent multiplex imaging experiments. This product is required to remove fluorescent oligos following the final round of signal amplification and imaging of SignalStar Oligo-Antibody Pairs. This buffer kit includes the reagents required for 10 slides. SignalStar Multiplex IHC Kits & Reagents are not compatible with all of Cell Signaling Technology® products and protocols that are recommended for use in immunohistochemical assays.
Product Usage Information
The SignalStar™ Fluorescence Removal Kit is intended for use following the SignalStar® Multiplex IHC Assay Manual protocol or the SignalStar® Multiplex IHC Assay for Use on BOND RX Fully Automated Research Stainer by Leica Biosystems protocol. Continue to follow all guidance and recommendations from the original protocol when using the SignalStar™ Fluorescence Removal Kit.
For the SignalStar® Multiplex IHC Assay Manual protocol:
1. After the second round of image acquisition, soak slides in dH2O for >30 min to gently remove coverslip.2. Combine reagents to create the SignalStar Fluorescence Removal Solution:
a. For 5 slides: 75 µL 10X dsDNase Buffer, 7.5 µL dsDNase, and 667.5 µL Nuclease-free Water #12931.
b. For 10 slides: 150 µL 10X dsDNase Buffer, 15 µL dsDNase, and 1,335 µL Nuclease-free Water #12931.
3. Cover with parafilm and vortex for 10 sec. Store all SignalStar kit components on ice when preparing solutions. SignalStar solutions should be used promptly once all reagents have been combined for the run.
4. Incubate slides in 150 µL of SignalStar Fluorescence Removal Solution for 2 hr at 37°C. (Use of a covered humidity chamber is highly recommended to prevent evaporation.)
5. Immerse slides in dH2O for 30 sec.
6. Complete any additional staining and imaging steps following your manufacturer’s protocol.
For the SignalStar® Multiplex IHC Assay for Use on BOND RX Fully Automated Research Stainer by Leica Biosystems protocol:
1. In the BOND RX software by Leica Biosystems, create a copy of the "CST SignalStar Imaging Round 2” protocol.
2. Change the name of the copy to "CST SignalStar Imaging Round 3” with the abbreviated name "CST Rd3.”
3. Select "Show wash steps."
4. Delete Steps 8-63, saving only steps 1-7 for fluorescence removal.
5. Add steps required for any additional staining following your manufacturer’s protocol.
6. Select "CST SignalStar" as the preferred Detection System (Note: Additional staining steps may require further selection of other Detection Systems. Please contact Leica Biosystems for assistance.)
7. Select "Create Protocol.”
8. Click the Save button and then the Yes button to acknowledge the caution message.
9. After the second round of image acquisition, soak slides in dH2O for >30 min to gently remove coverslip.
10. Combine reagents to create the SignalStar Fluorescence Removal Solution:
a. For 5 slides: 185 µL 10X dsDNase Buffer, 18.5 µL dsDNase, and 1,646.5 µL Nuclease-free Water #12931 in 1 BOND Titration Insert.
b. For 10 slides: 335 µL 10X dsDNase Buffer, 33.5 µl dsDNase, and 2,981.5 µL Nuclease-free Water #12931 in 1 BOND Titration Insert.
11. Cover with parafilm and vortex for 10 sec. Store all SignalStar kit components on ice when preparing solutions. SignalStar solutions should be used promptly once all reagents have been combined for the run.
12. In the BOND RX software, create a study and add slides.
13. When "adding slides," use the selections below for Tissue Preparation on BOND:
a. Slide preparation: -- (no value/not required)
b. Dispense Volume: 150 µL
c. HIER: -- (no value/not required)
14. Select "CST SignalStar Imaging Round 3," ensuring that Slide preparation is selected as "--" and HIER is selected as "--."
15. Print labels, add labels to slides, and place slides onto the slide tray.
16. Place 2-3 drops of dH2O onto each slide before adding BOND covertiles.
17. Start the BOND RX run.
Storage
使用に関する制限
法的な権限を与えられたCSTの担当者が署名した書面によって別途明示的に合意された場合を除き、CST、その関連会社または代理店が提供する製品には以下の条件が適用されます。お客様が定める条件でここに定められた条件に含まれるものを超えるもの、または、ここに定められた条件と異なるものは、法的な権限を与えられたCSTの担当者が別途書面にて受諾した場合を除き、拒絶され、いかなる効力も効果も有しません。
研究専用 (For Research Use Only) またはこれに類似する表示がされた製品は、 いかなる目的についても FDA または外国もしくは国内のその他の規制機関により承認、認可または許可を受けていません。 お客様は製品を診断もしくは治療目的で使用してはならず、また、製品に表示された内容に違反する方法で使用してはなりません。 CST が販売または使用許諾する製品は、エンドユーザーであるお客様に対し、使途を研究および開発のみに限定して提供されるものです。 診断、予防もしくは治療目的で製品を使用することまたは製品を再販売 (単独であるか他の製品等の一部であるかを問いません) もしくはその他の商業的利用の目的で購入することについては、CST から別途許諾を得る必要があります。 お客様は以下の事項を遵守しなければなりません。(a) CST の製品 (単独であるか他の資材と一緒であるかを問いません) を販売、使用許諾、貸与、寄付もしくはその他の態様で第三者に譲渡したり使用させたりしてはなりません。また、商用の製品を製造するために CST の製品を使用してはなりません。(b) 複製、改変、リバースエンジニアリング、逆コンパイル、 分解または他の方法により製品の構造または技術を解明しようとしてはなりません。また、 CST の製品またはサービスと競合する製品またはサービスを開発する目的で CST の製品を使用してはなりません。(c) CST の製品の商標、商号、ロゴ、特許または著作権に関する通知または表示を除去したり改変したりしてはなりません。(d) CST の製品をCST 製品販売条件(CST’s Product Terms of Sale) および該当する書面のみに従って使用しなければなりません。(e) CST の製品に関連してお客様が使用する第三者の製品またはサービスに関する使用許諾条件、 サービス提供条件またはこれに類する合意事項を遵守しなければなりません。