混合形質型白血病 (MLL)

MLL1野生型 (WT) およびノックアウト (KO) マウスの胚性線維芽細胞 (MEF) の抽出物を、MLL1 (D6G8N) Rabbit mAb (Carboxy-terminal Antigen) (上) およびα-Actinin (D6F6) XP^® Rabbit mAb #6487 (下) を用いてウェスタンブロッティングで解析しました。MLL1 WT MEFとMLL1 KO MEFは、ノースウェスタン大学のAli Shilatifard博士のご厚意により提供いただきました。

MLL1野生型 (WT) およびノックアウト (KO) マウスの胚性線維芽細胞 (MEF) の抽出物を、MLL1 (D6G8N) Rabbit mAb (Carboxy-terminal Antigen) (上) およびα-Actinin (D6F6) XP^® Rabbit mAb #6487 (下) を用いてウェスタンブロッティングで解析しました。MLL1 WT MEFとMLL1 KO MEFは、ノースウェスタン大学のAli Shilatifard博士のご厚意により提供いただきました。

クロスリンクさせた293T細胞由来のクロマチンに、DOT1L (D1W4Z) Rabbit mAbあるいはNormal Rabbit IgG #2729のいずれかと、SimpleChIP^® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005を用いてクロマチン免疫沈降を実施しました。濃縮したDNAは、SimpleChIP Human PabPC1 Exon 1 Primers #77410、Human RPLP0 Exon 2 Primers、SimpleChIP Human α Satellite Repeat Primers #4486を用いて、リアルタイムPCRで定量しました。インプットクロマチンの総量を1とし、各サンプルで得られたDNA量の相対値を示しています。

クロスリンクさせた293T細胞由来のクロマチンに、DOT1L (D1W4Z) Rabbit mAbあるいはNormal Rabbit IgG #2729のいずれかと、SimpleChIP^® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005を用いてクロマチン免疫沈降を実施しました。濃縮したDNAは、SimpleChIP Human PabPC1 Exon 1 Primers #77410、Human RPLP0 Exon 2 Primers、SimpleChIP Human α Satellite Repeat Primers #4486を用いて、リアルタイムPCRで定量しました。インプットクロマチンの総量を1とし、各サンプルで得られたDNA量の相対値を示しています。

クロスリンクさせたK-562細胞由来のクロマチンに、SimpleChIP^® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005とp300 (D2X6N) Rabbit mAbを用いてクロマチン免疫沈降を実施しました。DNA Library Prep Kit for Illumina (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795を用いて、ChIP-seqで濃縮したChIP DNA 5 ngからDNAライブラリーを調製し、Illumina NextSeqでシーケンスしました。この図は、FDPS遺伝子全体の結合を示しています。

クロスリンクさせたK-562細胞由来のクロマチンに、SimpleChIP^® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005とp300 (D2X6N) Rabbit mAbを用いてクロマチン免疫沈降を実施しました。DNA Library Prep Kit for Illumina (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795を用いて、ChIP-seqで濃縮したChIP DNA 5 ngからDNAライブラリーを調製し、Illumina NextSeqでシーケンスしました。この図は、FDPS遺伝子全体の結合を示しています。